乾界生物：关于蛭弧菌及其在水产养殖中的使用|163

蛭弧菌是一种具有类似噬菌性质的细菌，但它不是噬菌体，更不是细菌。它虽然比通常的细菌小，能通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用，但它不是病毒，确确实实是一类能"吃掉"细菌的细菌。它对弧菌有较强的裂解作用，是水产养殖中主要病菌“弧菌”的天敌。乾界生物日籍教授笹平俊老师研究发现蛭弧菌不仅对弧菌有裂解作用，还对白班病等病毒性疾病有显著效果，但对病毒的作用机理目前乾界生物还在研究中。乾界生物的笹平俊老师是蛭弧菌研发的鼻祖人物，也是日本水产养殖微生物学奠基人。

一、蛭弧菌的形态特征

相差显微镜观察表明，蛭弧菌具有细菌的一切形态特征：单细胞，弧形或逗点状，有时呈螺旋状。大小为0.3-0.6×0.8-1.2微米，或仅为杆菌长度的1/3-1/4。端生鞭毛很少多于一根，有的在另一端生有一束纤毛。水生蛭弧菌的鞭毛还具鞘膜，它是细胞壁的延伸物，并包围着鞭毛丝状体，所以比其他细菌的鞭毛粗3-4倍，这是一个很显著的特点。蛭弧菌运动活跃，革兰氏染色阴性。细胞中蛋白质含量较高，有的占干重的60-70%。DNA含量5%，GC百分数为42-51。

二、蛭弧菌的生活方式

蛭弧菌的生活方式多样，有寄生型的，也有兼性寄生的，极少数营腐生。寄生型必须在生活宿主细胞或在有其提取物中得到营养或生长因子时才能生长繁殖，并表现出严格的特异性；非寄生型营腐生生活，或者至少是兼性腐生，可在蛋白胨和酵母提取物培养基上生长繁殖，它们中绝大多数都丧失了寄生性，只有十几分之一可恢复寄生性。

实验证明，从自然界分离的都呈依赖寄生型，与宿主细胞间常表现出一定的特异性，但有的特异性较差，能侵入多种细菌。普遍证实蛭弧菌在适宜宿主上形成噬菌斑的pH值为5．5～9．0，最适pH值为 7.0～8.0。蛭弧菌对热敏感，50℃以上时，30分钟失去活性；40℃时30分钟减少一半的活性；在4℃～37℃条件下都有可生长，最适生长温度为25℃～30℃，为一类嗜中温性细菌。蛭弧菌在死菌中形成噬菌斑数是活菌的35～290倍。

三、蛭弧菌的活动

蛭弧菌既有自由生活的、能运动、不进行增殖的形式，又有在特定宿主细菌的周质空间内进行生长繁殖的形式。蛭弧菌的生长过程可分为两个时期：具有1根有外鞘的极生鞭毛和高度的运动性的攻击期扩鞭毛脱落，不具有运动性的生长周期。

蛭弧菌侵入宿主细菌的方式十分独特。开始时，它以很高的速度(每秒高达100个细胞长度)猛烈碰撞宿主细胞，以没有鞭毛的一端直接吸附到宿主细菌上，菌体转动速度超过200r／s，在此之后，鞭毛脱落，然后释放出多种酶以穿透宿主细胞壁的小孔右进入到细胞内，和细胞膜之间或直接进入细胞间质中。侵入过程仅几秒钟。穿入宿主菌后，鞭毛消失，整个过程最长为60分钟。在吸附至侵入开始前的5-10分钟，宿主细胞出现卷曲现象，这可能因为蛭弧菌产生的胞壁酸酶等使之转化为球质体的缘故。蛭弧菌侵入周质空间的同时失去鞭毛，受到感染的宿主细胞也开始膨胀，变为一个对渗透压并不敏感的球形体。此称"蛭弧体"。它利用宿主的原生质为养分生长，经过一定时间后，宿主营养被完全吸收，长螺旋状的菌体均等二分裂出许多带鞭毛的子代，它们可以重新浸染宿主，开始下一个循环过程。完成这一增殖的全过程约需4小时。子代细胞遇到敏感宿主又可重新侵染，开始下一个循环。

四、蛭弧菌的噬菌条件与保藏方法

蛭弧菌对酸碱度、温度等环境因子的要求并不严格。蛭弧菌对环境条件的适应性强，对温度和pH的适应范围较广。蛭弧菌的保藏关系到其规模化生产和应用。蛭弧菌的保藏方法为冷冻干燥法，即21个月复活率为100%；-20℃甘油保藏法和4℃NB液保藏法17个月的复活率为67%。

五、乾界“蛭弧菌”

1.功效

乾界“蛭弧菌”具有抑杀弧菌的作用。其中，对副溶血弧菌（绿弧菌）、哈维氏弧菌（发光弧菌）有特效，可在使用前后通过弧菌测试剂盒检验证明；其次，对因弧菌引起的空肠空胃、肝胰腺萎缩、肠炎、白便等症状，可通过外泼、内服有效抑杀水体及虾体内的弧菌，使未染病虾保持健康，发病但仍吃料的虾逐渐恢复；“蛭弧菌”对白斑综合症也有明显的效果。

2.使用方法

（1）水体泼洒

①预防用量：每次施用时用水稀释后直接泼洒，用量为200ml/亩*米，每隔5天连用2天，每天一次。

②治疗用量：每次施用时用水稀释后直接泼洒，用量为300ml/亩*米，每隔2天连用2天，每天一次。

一般72小时内弧菌数量下降到安全值以下。

（2）饵料投喂

乾界“蛭弧菌”可依据不同病程，按相应比例与饵料均匀搅拌后一起投喂。

①预防时，按1%添加，每3天一次，每周2次；

②弧菌病症明显时，按2%添加，每3天一次，每周2次；

③水生动物因弧菌病症刚开始死亡时，按2%添加，每天一次；

④水生动物已经因弧菌症死亡一阶段时，按3%添加，每天一次。

⑤病症开始好转时，可逐渐减少用量。