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颜色分离的实用技巧

俗话说：时间就是金钱，效率就是生命。高效分析图片对科研人员来说不仅意味着能早日发表SCI论文还能节省头发。

举个简单的例子，Masson三色染色是胶原纤维染色的权威经典方法，染色结果肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色。

如何高效的分离Masson染色的红色和蓝色并计算其胶原容积分数呢？ImageJ就你能轻松实现不同颜色的分离：

接下来今天半夏给大家分享一些基于ImageJ的高效图片分析技巧！

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ImageJ 高效分析Masson染色图片

Masson 染色的分析通常是计算胶原容积分数 (Collagenvolume fraction，CVF)，即胶原阳性的蓝色面积与组织总面积的百分比。

一般分析方法为：Image -> Adjust -> Threshold,调节Hue（色度）、Saturation（饱和度）与Brightness（亮度）选中胶原计算其面积。该方法需要手动调节HSB阈值，效率低下。

高效分析步骤如下：

1. ImageJ软件File -> Open打开待分析Masson染色图片：

2. Image -> Color -> Colour Deconvolution，选择Masson Trichrome，点击OK即可得到分离结果：

分离的红色肌纤维与左侧原始图片范围一致，但胶原仅为着色较深的蓝色：

3. 测量胶原面积

Image-> Adjust -> Threshold,调节阈值使胶原被选中（红色代表选中）：

Analyze -> Set Measurements检查Area与Limit to threshold是否被选中，Limit to threshold后仅测量阈值选定范围的面积，否则测量的为整张图片的面积。Analyze -> Measure，得到胶原面积为107695平方像素:

4. 测量组织总面积

Image-> Adjust -> Threshold,调节阈值使组织被选中：

Analyze -> Measure得到组织总面积：

胶原容积分数=107695/238703 x 100% =45%。

扩展：IHC Toolbox拆分颜色