美国生物学家乔治戴利曾说：如果 20 世纪是药物治疗时代，那么 21 世纪就是细胞治疗的时代。间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs），被称为「最实用、最具潜力」的干细胞，是干细胞治疗名副其实的主力军。相应的，能否有效扩增培养 MSCs，成为影响其应用的关键环节之一。

本文针对间充质干细胞的功能和培养方式展开介绍，文末还有免费试用的 MSCs 培养基，快来一睹为快吧。

MSCs 为何成为干细胞治疗宠儿

MSCs 是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，在特定的诱导条件下，能够分化为不同类型的细胞，包括成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、神经细胞等。

MSCs 分化而成的细胞可以直接参与机体损伤的修复。MSCs 能进行免疫调节，发挥抗炎和降低适用性免疫应答的作用，同时具有促进血管生成、抑制细胞凋亡的特性。

MSCs 主要功能机制[1]

在临床中，MSCs 可应用于解决多种血液系统疾病、心血管疾病、自身免疫性疾病、神经系统疾病，并在脑卒中、干预肝硬化、膝关节半月板部分切除损伤修复等疾病上取得了重大突破，临床应用价值不菲。

截止 2020 年 11 月，在全球最大的临床实验数据库 ClinicalTrial 中注册的间充质干细胞临床试验研究，全球范围内开展的共约 1,200 项。在与新冠肺炎的全球战疫中，研究发现 MSCs 移植治疗新冠肺炎具有安全性和有效性，能够缓解病人症状，改善肺部炎症[2]。

此外，MSCs 来源外泌体在治疗重症新冠肺炎患者成效显著，康复率高达 71%。外泌体具有安全性、恢复氧合、下调细胞炎症因子和重建免疫系统功能等优点，是一种很有前途的新冠肺炎治疗候选药物[3-4]。

MSCs 培养基的发展更迭

MSCs 培养基是经灭菌的液体培养基，包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清或无血清。MSCs 培养基能够选择性地促进 MSCs 体外培养时的生长和分化，并为其达到理想营养平衡状态提供保障。

MSCs 培养基，从面世到现在，已经走过了 3 代。

  • 第一代：培养基+牛血清。未知组分及动物来源组分极多，人体安全性查，批次性能差别大；

  • 第二代：培养基+牛/人血小板裂解物（牛/人血清替代物）。未知组分及动物来源组分相对较少，但人体安全性与批次性能差别未有改善；

  • 第三代：有明确配方的培养基，用成分明确的、非动物来源的化学物质和重组细胞因子完全替代了血清或血小板裂解物。没有未知组分、低内毒素、批间一致性高，人体安全性高，批次性能差别小。特别是对于 MSCs 外泌体研究，该培养基较之前两种不会有未知来源的外泌体干扰。

第三代产品的优势是众所周知的，这种培养基如今在欧美国家的疫苗企业已广泛使用，在我国的某些领域也有零星使用。

并未普及的原因是产品组分有上百种，每种组分的量又在一个范围区间，因此该配方组合数量是无穷大的。开发第三代培养基需要高通量分析设备与大量的人员投入，研发费用极高，相应的其市场销售价格较前二种培养基高。

寻找高性价比的第三代培养基

Bio-Techne 旗下 Novus Biologicals® 品牌为广大间充质研究者提供了极具性价比的无血清成分确定培养基，可以用于脐带、骨髓和脂肪等来源的 MSCs 培养。

货号

规格

零售价（折扣请咨询经销商）

YSP013

500 mL

2880 元

YSP015

100 mL

试用装

该培养基有以下主要优势：

无血清，成分确定：保证安全

  • 无免疫原性干扰

  • 无细菌污染之忧

  • 无未知因子

  • 无内毒素

  • 无 FBS 供应短缺之忧

  • 无批间差

高扩增效率

  • 扩增效率高，节约培养基使用成本；

  • 连续培养 15 代，细胞倍增时间更短且稳定；

  • 扩增同样的细胞总数量所需传代数更少。

高品质：遗传稳定性高

  • 按照 ISCT 标准来检测扩增后的 MSCs 表面 Marker，经 Novus 培养基培养后 CD73、CD90 和 CD105 为阳性，CD14、CD34、CD45 和 HLA-DR 为阴性。

高品质：干性维持度高

  • 比较经 Novus 培养基、FBS/DEME 和其他 2 种无血清培养基培养后的 ADSC 三系分化能力。

*注意：由第一、二代培养基换成三代培养基需要做驯化处理或使用增加黏附力的培养皿（使用基质或特殊表面处理）。

最后，再为大家安利一款已经搭配好的多色 MSCs 表型流式鉴定试剂盒Human Mesenchymal Stem Cell Verification Flow Kit （FMC020），该款试剂盒是根据国际细胞治疗协会（ISCT）对 MSCs 鉴定的标准量身定做的。

试剂盒中配有三个 MSCs 阳性标志物：CD90-APC、CD73-CFS 和 CD105-PerCP，5 个阴性标志物 cocktail：CD45-PE、CD34-PE、CD11b-PE、CD79A-PE、HLA-DR-PE，还配有这些抗体对应的所有同型对照抗体以及流式染色 buffer。无需自己搭配，操作方案明确，数据形式清楚明了，是做 MSCs表型鉴定不可多得的工具。

使用流式细胞术检测人骨髓间充质干细胞的表面标志物。使用人 MSCs 多色流式鉴定试剂盒（R&D Systems，货号 FMC020）染色。数据显示间充质干细胞相关表面抗原 CD73、CD105、CD90/Thy1 表达阳性，阴性混合标志物包括 CD11b/Integrin alpha M、CD34、CD45、CD79A、HLA-DR 在内的所有标志物表达阴性。

✦免费试用

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活动规则：

  • 申请时间截止 2020 年 12 月 31 日；

  • 活动仅限中国大陆地区；

  • 如遇疑问，欢迎拨打热线 400-821-3475，垂询详情。

参考文献：

[1] Ying Wang, Xiaodong Chen, Wei Cao, Yufang Shi. Plasticity of mesenchymal stem cells in immunomodulation: pathological and therapeutic implications. Nat Immunol.2014 Nov;15(11):1009-16.

[2] Leng Z, Zhu R, Hou W, et al. Transplantation of ACE2- Mesenchymal Stem Cells Improves the Outcome of Patients with COVID-19 Pneumonia. Aging Dis. 2020;11(2):216-228.

[3] Leila Rezakhani, et al. Mesenchymal stem cell (MSC)-derived exosomes as a cell-free therapy for Patients Infected with COVID-19: Real Opportunities and Range of Promises. Chem Phys Lipids. 2020 Nov 12;105009.

[4] Sai Kiang Lim, et al. Exosomes Derived from Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells as Treatment for Severe COVID-19. Stem Cells Dev. 2020 Jun 15;29(12):747-754.

图文来源：Bio-Techne