作者 | 陆小玲
单位 | 桂林市妇女儿童医院
近年来，质谱技术在细菌鉴定上的应用越来越广泛，它以适应范围广、准确、灵敏、特异、鉴定快速、高通量、经济实惠等优点逐步取代传统的生化鉴定，质谱技术对于微生物的菌种的鉴定具有革命性的重大意义。
然而，作为检验人，传统的生化鉴定不应该被遗忘，尤其是细菌鉴定生化反应的理论知识不应该被我们忘记，这也是职称考试经常出现的考点。
相信正在备考的小伙伴们，光是记生化反应的几大类如：碳水化合物的代谢试验、碳源和氮源利用试验、各种酶类试验等就已经蒙圈了，还要记住一些菌的生化反应如大肠埃希菌的吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐（IMVC）为++--，简直是太难了。下面就我在职称考试中的亲身经历，跟大家分享一些自己的小小经验。
我于2020年9月27日参加临床检验技术（中级）职称考试，其中的一道题目让我印象深刻，如下：哪个生化反应可以鉴别肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌（大致意思，原题已记不清）：A：O/F试验；B：吲哚试验；C。。。。。。
当时我从事微生物工作不久，临床上鉴定出很多株肺炎克雷伯菌，但似乎还没有检出一株产酸克雷伯菌，在备考练习时，也没有复习到相关内容，我只好选了一个工作中做得最多的试验O/F试验。
巧的是在考完试后的一周，我就鉴定出一株产酸克雷伯菌，这引起了我的兴趣，原来产酸克雷伯菌的吲哚试验为阳性，而肺炎克雷伯菌为阴性，两者的O/F试验均为阳性。在工作中发现，产气肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌的生化反应都较为相似。
肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌同属克雷伯菌属，为较短粗的杆菌，大小0.5～0.8×1～2um,单独、成双或短链状排列。无芽胞，无鞭毛，无动力，具有明显的荚膜，多数有菌毛（见图1）。
图1：肺炎克雷伯菌（来自网络图片）
产气肠杆菌为革兰阴性粗短杆菌，菌体大小长约1.2-3.0μm、宽0.6-1.0μm，部分菌株有荚膜，无芽孢，有周身鞭毛，有动力（见图2）。
肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和产气肠杆菌的生化反应都较活跃，能分解多种糖产酸。三者的生化反应总结如表1：
表1：肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、产气肠杆菌的生化反应
值得注意的是，肺炎克雷伯菌对氨苄西林天然耐药，产气肠杆菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、氨苄西林/舒巴坦天然耐药，这应该引起临床医生的重视，在经验用药时应该避开使用这些菌天然耐药的药物，以达到临床治疗效果。这也是职称考试的考点。
在备考职称考试复习细菌的生化反应时，可以用一些小技巧来帮助记忆，首先从最简单的开始。
（1）抑菌试验（O/129抑菌试验、杆菌肽试验、奥普托欣试验）：均为贴药敏纸片试验；
（2）碳源和氮源利用试验：有二盐（枸橼酸盐利用试验、丙二酸盐利用试验）；
（3）各种酶类试验：硝酸盐还原试验无“酶”，但为酶类，苯丙氨酸脱羧酶试验和氨基酸脱羧酶试验有“酶”，但为蛋白质和氨基酸的代谢试验，其他有“酶”均为酶类试验；
（4）蛋白质和氨基酸的代谢试验：除了以上两个有“酶”的，还有明胶液化试验、吲哚（靛基质）试验、硫化氢试验、尿素分解试验；
（5）碳水化合物代谢试验：记住以上这些，通过排除法，其他均为碳水化合物代谢试验（糖（醇、苷）类发酵试验、O/F试验、ONPG试验、七叶苷水解试验、甲基红试验、V-P试验）。
最后祝各位小伙伴们逢考必过，在考试中取得优异的成绩。
【参考文献】
[1]倪语星,尚红.临床微生物学检验［M］.第5版.北京：人民卫生出版社，2012.
[2]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱［M］.北京：人民卫生出版社，2011.
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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼
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