游离脂肪酸 (free fatty acids, FFAs) 水平紊乱与多种慢性疾病的发生发展密切相关【1-4】，因此对FFAs精准检测具有重要科学意义。FFAs依据碳链长度科分为短链、中链和长链脂肪酸，其中，短链脂肪酸（SCFAs）的检测较为复杂，其传统检测方法为气相色谱-质谱联用法 (GC-MS)，然而GC的灵敏度、检测限、样品需气化等衍生条件局限。近年来得益于新技术发展，SCFAs的液相色谱-质谱检测（LC-MS）克服了GC-MS的诸多缺陷。然而对SCFAs的LC-MS直接检测由于质谱负离子模式信号响应低，难以构建由母离子-子离子构成的专属离子对，使得检测灵敏度及特异性大大降低。

近日，陆军军医大学新桥医院/重庆大学附属肿瘤医院李咏生教授课题组在脂质研究领域经典期刊Journal of Lipid Research发表研究论文Integrated LC-MS metabolomics with dual derivatization for quantification of free fatty acids in fecal samples of hepatocellular carcinoma patients，通过使用双衍生化策略【5-8】联合LC-MS建立的脂质组学检测方法，实现了对游离脂肪酸的精准检测。

该方法以N,N-二甲基乙二胺 (DMED) /丹磺酰肼 (Dns-Hz) 标记样本，作为“轻”标记，以N,N-二乙基乙二胺 (DEEA) / N, N-二乙基丹磺酰肼（Dens-Hz）标记标准品，作为“重”标记，并以此作为内标，由此样本及其内标含有恒定质量差标签，且色谱保留时间接近，从而实现脂肪酸及其内标的“一对一”相对精确定量。

利用该方法，对临床肝癌患者粪便样本进行了快速检测，结果表明丙酸 (Propionate)、丁酸 (Butyrate) 及二甲基丁酸 (2-methylbutyrate) 的含量较正常对照组显著降低，其余乙酸 (Acetate), 甲基戊酸 (methylvaleric acid), 正戊酸 (valeric acid) 异戊酸 (isovaleric acid), 特戊酸 (pivalic acid) 和己酸 (hexanoic acid) 的含量在两组间无显著差异，这与肝癌患者肠道菌群多样性减低，SCFAs含量下降结果相一致。

该策略具有标签试剂易获取、衍生反应步骤少、产物极性适中、稳定且实现单样本快速检测等优点 (如图1)，为短链脂肪酸的精准检测提供了新思路。

2019级博士生张建钢和杨帅为共同第一作者，陆军军医大新桥医院/重庆大学附属肿瘤医院李咏生教授和重庆大学附属肿瘤医院李艳副教授为共同通讯作者。

原文链接：

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022227521001255

制版人：十一

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