本文介绍美国研究人员克里斯塔·古德尔(Christa Goodell)等人在越南所做的对非瘟“拔牙”方案的有效性进行的研究。以及评估商业的快速检测和PCR检测相比OIE参考实验室的检测效果的准确度对比。
越南农业和农村发展部于2019年2月19日正式报告发生非洲猪瘟(ASF)疫情。随后该国损失了超过600多万头猪,占越南全国生猪产量的20%。随着非瘟疫情的持续,最早在中国养猪业使用的用于控制非瘟的“拔牙”方案在越南也被广泛采用,作为对母猪群清群的一个替代方案。该方案简单说就是:剔除表现出有非瘟临床症状的零号病例母猪和它邻近两侧的母猪(条件允许的情况下对母猪采集全血样本开展PCR检测)。
本研究的目的是测试这种“拔牙”方案现场的有效性,并使用收集的血液样本对商业检测点开展的检测,包括快检(QT)和核酸检测(PCR),与OIE批准的专业实验室的检测结果进行比较。
该实验总共收集了52次疑似非瘟爆发事件中的764个样本。“疑似非瘟爆发事件”的定义是:农场看护人员发现了母猪表现出OIE所确定的非瘟临床症状。对于每个疑似非瘟爆发事件,从零号母猪和零号母猪周围的14头猪身上采集全血(图1)。样品在到达实验室后24小时内,使用OIE认证的实时PCR方法(STAND)检测非瘟病毒的DNA。
把723个样本(46次事件)和50个已知阴性的样本送到商业检测点进行两次快检(QT A和B)和3次PCR检测(PCR A、B和C)。具体检测方法按照说明书进行。之后将该结果与STAND的检测结果进行比较。
图1 采样方案:红色(F0)为零号病例,F1指直接接触(蓝色),F2指间接接触,A为饮水下游,B为饮水上游。总共采集15头母猪。
研究结果显示,在52次事件中,有17次事件(33%)包括零号母猪在内的全部15头母猪均为PCR阴性。在35次阳性PCR事件中有19次事件(54%),在移除了零号病例和两侧直接接触病例之后,剩下猪里面还会至少有1头是阳性(图2)。
图2 与零号病例不同相对位置的阳性病例情况
表1显示的是商业检测点开展的快检及PCR检测与OIE认证的STAND的检测的结果比较。
表1:与OIE(p72)实时PCR相比的商业检测点的测试性能
该研究团队推断认为,“拔牙”不足以清除非洲猪瘟。在不表现症状的母猪血液中也可以检出病毒DNA。商业检测点的PCR检测在检测阳性样本时的敏感度只有85%,不足以支撑非瘟清除工作,只有在无法获得标准实验室资源时才可以考虑使用。快检对于非洲猪瘟检测不可靠。
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