天啦!色谱柱怎么又超压了?分离度怎么这么差?怎么还有结晶析出?最近实验室用的色谱柱频繁出状况!是色谱柱老旧了么?但是新买的柱子没有用多久也频频出现问题,到底怎么回事?
直到最近,偶然看到刚来的师弟在用完机器后就随手放置色谱柱,也不清洗保养,还反问到:大家不都这样做的吗?
难怪!大家竟然都忽略了色谱柱的正确使用方法,刚来的师弟也不懂色谱柱该如何储存,以为用完直接收起来就可以了......这下看来我这当师兄的也要跟着挨一顿老板的骂了……
用过高效液相色谱仪的都知道,色谱柱是高效液相色谱仪最主要的部件,被测物质能否被很好的分离和测定,色谱柱的性能起着决定性的作用。因此,应特别注意色谱柱的日常维护,正确使用与维护可以延长色谱柱的使用寿命。
为此,这次用亲身经历的惨痛教训再为大家普及一下常见色谱柱的长时间保存方法,以便大家妥善储存已开封使用的色谱柱并保障其性能。
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常规反相色谱柱
在室温条件下,如果超过四天不使用反相色谱柱,请将柱子保存在 100% 乙腈中;对于高温条件下的应用,在工作结束后即快速将色谱柱保存在 100% 乙腈中以延长色谱柱的使用寿命。不要将色谱柱保存在缓冲盐流动相条件下。
如果流动相中含有缓冲盐,先用 10 倍柱体积的液相色谱级水冲洗色谱柱然后换上 100% 乙腈保存。如果没有进行这一中间步骤直接换成 100% 乙腈将会导致缓冲盐析出。
2
HILIC 色谱柱
如果在室温条件下,超过四天不使用的 HILIC 色谱柱,请将色谱柱保存在乙腈/水溶液(95/5)中。不要将色谱柱保存在缓冲盐流动相条件下,如果所使用的流动相中含有缓冲盐,用 10 倍柱体积的含 95% 乙腈水溶液冲洗色谱柱。Amide色谱柱可以保存在 100% 乙腈中。
注意:如果色谱柱曾经在使用了含有甲酸盐(甲酸或甲酸铵等)的流动相之后又用 100% 乙腈冲洗或保存,当该柱再次用甲酸盐体系的流动相时可能需要稍长的时间来达到平衡。
3
SEC 色谱柱
使用 20 倍柱体积的水溶液清洗色谱柱中所有的缓冲盐,再用 20 倍柱体积 20% 甲醇水冲洗保存。以防止菌体污染。
4
UPC² 色谱柱
如果使用了添加剂建议用至少 5 倍柱体积的 50% 甲醇/CO2 冲洗色谱柱,并将其储存在纯 CO2 中。这可避免或最大限度减小色谱柱在储存期间出现改变。不建议将色谱柱储存在甲醇中。
而色谱柱除了要注意保存方法外,高品质的色谱柱本身才是最重要的一环。
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内容策划:邹礼平
内容审核:朱超敏
题图来源:图虫创意
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