来源：检验学姐笔记
9.红细胞计数操作方法
牛鲍氏计数板
总结：计数池内有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大格，每个大格面积为1.0mm2，容积为0.1mm3（μl）。
中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角的5个中方格是红细胞和血小板计数区域。每个中方格用单线分为16个小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。
微量吸管----水银称重校正
压线红细胞计数原则：数上不数下，数左不数右
公式：RBC=5个中方格内红细胞数×5×10×106×200
×5（5个中方格换算成1个大方格）
×10(1个大方格容积为0.1μl,换算成1.0μl)
×200（稀释倍数）
×106（由1μl换算成1L）
红细胞稀释液:
①Hayem液由NaCl(调节渗透压)、NazS04(提高比密防止细胞粘连)、HgCl(防腐)和蒸馏水组成，
缺点：遇高球蛋白血症患者，由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。
②枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。
10.血红蛋白测定
检测原理
①氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法：可检测血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种Hb，被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，在540nm处测定吸光度，经换算得到血红蛋白浓度。
本法为参考方法，但是不是常用方法，缺点：剧毒
②十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS）测定法：血液中除SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS作用，在538nm处测定吸光度，经换算得到血红蛋白浓度。
缺点：不能直接用吸光度计算
优点：无公害
③叠氮高铁血红蛋白法(HiCN)：542nm，毒性为HiCN1/7.
④溴代十六烷基三甲铵血红蛋白测定法（CTAB）：缺点：准确度和精密度不佳
质量控制
①HiCN贮存转化液应贮存在棕色有塞玻璃瓶中，不能贮存在塑料瓶中，否则会使CN丢失，测定结果偏低。HiCN转化液在4℃保存一般可数月，不能在0℃以下保存，因为结冰可使高铁氰化钾还原，试剂失效。
②氰化钾试剂是剧毒品，测定后的废液首先以水稀释废液(1:1)，再加次氯酸钠35m1/L，充分混匀，放置15小时以上，使CN氧化成CO2和N2挥发，或水解成CO2和NH2再排入下水道。
废液不能直接与酸性溶液混合，因为氰化钾遇酸可产生剧毒的氰氢酸气体。
参考值
男性120〜160g/L；女性110〜150g/L；新生儿170〜200g/L
11.红细胞形态检查
异常红细胞形态
缺铁性贫血HB下降速度＞RBC下降速度
巨幼细胞贫血HB下降速度＜ RBC下降速度
正常红细胞双凹圆盘形、大小一致，平均直径为7.2μm，淡粉红色，中央1/3为生理性淡染区，胞质内无异常结构
①小红细胞----直径<6μm---------缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血等
②大红细胞----直径>10μm------巨幼细胞贫血、溶血性贫血
③红细胞大小不均-------巨幼细胞贫血
④巨红细胞 -----直径>15μm----巨幼细胞贫血及肝、脾切除术后
血红蛋白含量改变
①正常色素性：淡粉红，中央有生理性淡染区。
②低色素性：淡染区扩大，形成环形红细胞。
形态改变
①球形红细胞————遗传性和获得性球形细胞增多症
②椭圆形红细胞————遗传性椭圆形细胞增多症（25-75%）、大细胞性贫血等(＜25%)，正常人<15%。
③靶形红细胞————地中海贫血（β珠蛋白生成障碍性贫血）
④口形红细胞————口形红细胞增多症
⑤镰形红细胞————镰状细胞贫血、
⑥棘红细胞————β-脂蛋白缺乏症、酒精中毒
⑦裂红细胞（正常人＜1%）————弥散性血管内凝血
⑧缗钱状红细胞————多发性骨髓瘤
⑨新月形红细胞————PNH
⑩泪滴形红细胞————骨髓纤维化
红细胞内结构异常
①豪焦小体（Howell-Jolly小体,染色质小体）暗紫色圆形小体；核碎裂、溶解后的残余部分。见于脾切除，溶血性贫血。
②卡波环：呈环形或8字形；核膜或纺锤体残余物，胞质中脂蛋白变性
③嗜碱性点彩红细胞：瑞氏染色后，胞质内出现形态不一的蓝色颗粒（变性RNA），形态不一，多少不等，属于未完全成熟红细胞。见于铅中毒等。
④寄生虫
12.血细胞比容测定
概念
血细胞比容（HCT、Hct、Ht或PCV）是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占百分比。
检测原理
①WHO推荐的是微量法
②临床常用血液分析仪法
参考值
温氏法：男性0.40〜0.50，女性0.37〜0.48（最新版教材）
临床意义
Hct减低各种贫血
Hct增高血液浓缩、临床输血，输液疗效观察。
方法
离心后血液分为5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层（紫黑红色）、带氧红细胞层（鲜红色）。读取还原红细胞层（紫黑红色），乘以0.01口诀：浆小白核还带氧。
13.红细胞平均指数
检测原理
①MCV（fl）=Hct/RBC1fl=10-15L（口诀:8月15嫦娥飞天）
②MCH（pg）=Hb（g/L）/RBC1pg=10-12g；（口诀：年底杀猪）
③MCHC（g/L）=Hb（g/L）/Hct
公式技巧：
先记：mcv＝hct/rbc
再记mchc＝hb/hct
最后mch＝hb/ rbc
（后面把前面的分解 hb不变分解了上面）
参考值
注：成人 MCV80～100fl，MCH27～34pg，MCHC320～360g/l（老版教材）
MCV82～100fl，MCH27～34pg，MCHC316～354g/l（最新版教材）
临床意义
红细胞各项指标正常-----再生障碍性贫血
大细胞贫血MCV↑，MCH↑，MCHC正常----各种造血物质缺乏或利用不良
单纯小细胞贫血MCV↓，MCH↓，MCHC正常------慢性感染性贫血
小细胞低色素贫血MCV↓，MCH↓，MCHC↓----缺铁性贫血、铁利用不良
MCV红细胞凝集(如冷凝集素综合征)假性增高。
MCH 高脂血症、假性增高。
14.红细胞体积分布宽度（RDW）
概念
（RDW）红细胞体积大小的异质程度,常用变异系数（CV）表示
参考值
＞15%异常
临床意义
①贫血形态学分类
②缺铁性贫血筛选诊断和疗效观察的指标
③缺铁性贫血和β珠蛋白生成障碍性贫血区别
贫血MCV/RDW分类法
MCV
RDW
常见疾病
减少
正常
轻型珠蛋白生成障碍性贫血
减少
增高
缺铁性贫血
正常
正常
再生障碍性贫血 肾性贫血
正常
增高
铁缺乏早期、镰状细胞贫血
增高
正常
骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血
增高
增高
巨幼细胞贫血
15.网织红细胞（Ret）计数
概念
网织红细胞属于过渡细胞，介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间，属于未成熟红细胞。胞质内残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA）。
WHO推荐使用的网织红细胞活体染液为新亚甲蓝，染色能力强且稳定
网织细胞计数仪法将Ret分成
强荧光强度网织红细胞(HFR)
中荧光强度网织红细胞(MFR)
弱荧光强度网织红细胞(LFR)三类
网织红细胞成熟指数[RMI，RMI=(MFR+HFR)/LFRx100]
显微镜计数法：成人0.008〜0.020或（25〜85）×109/L
ICSH推荐使用Miller窥盘，其CV约为10%
分类
①网织红细胞根据形态特征和成熟分度分为4型：
I型（丝球形）
II型（网型）
III型（破网型）
IV型（点粒型）最常见
临床意义
①判断骨髓红细胞造血情况
②贫血疗效：缺铁性贫血、巨幼细胞贫血铁剂治疗后3〜5d，网织红细胞开始上升，7〜10d达到高峰，2周以后逐渐降至正常水平，则治疗有效
③骨髓移植后监测
④网织红细胞生成指数(RPI)是网织红细胞生成相当于正常人的倍数
16.点彩红细胞计数
概念
胞质中残存嗜碱性物质（RNA）变性，瑞氏染色后，红细胞呈粉红色胞质中有粗细不等的蓝黑色颗粒；碱性亚甲蓝染色后，红细胞呈淡蓝绿色，颗粒呈深蓝色。
参考值：＜0.03％
意义
增高：铅中毒。
17.红细胞沉降率（ESR）测定
概念
红细胞在单位时间内沉降速度
常用方法为魏氏法，为ICSH推荐方法（抗凝剂109mmol/L）比例1:4，黑色管
儿童常用潘氏法。
参考值
成人：男性0〜15mm/h，女性0〜20mm/h
质量控制
①血沉减慢:小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等
②血沉加快:大分子蛋白如纤维蛋白原、急性反应蛋白、巨免疫球蛋白球蛋白、胆固醇
口诀：血沉加快:荡秋千
荡 —— 胆固醇
秋 —— 球蛋白
千 —— 纤维蛋白原
减慢:白色鹅卵石
白 —— 白蛋白
卵 —— 卵磷脂
③管倾斜，速度快。倾斜3°，增加30%。
④抗凝剂增加、血液凝固血沉减慢。
⑤室温过高快，室温过低慢。
临床意义
红细胞沉降率增快：
①生理性，见于月经期，妊娠3个月以上及老年人；
②病理性：炎症、组织损伤（心肌梗死血沉快，心绞痛血沉正常）、恶性肿瘤（快）良性肿瘤（正常）、高球蛋白血症（MM）、高胆固醇血症和贫血（＜90g/L）等。
热门跟贴