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医学界带您看2023 WCLC中国之声
撰文丨羊羊
2023肺癌领域学术盛会世界肺癌大会（WCLC）于9月9日至12日在新加坡召开，作为肺癌领域的年度盛典，世界各地肺癌领域大咖齐聚一堂，多项极具分量的重磅进展将在会上发表，为肺癌诊治领域注入新生力量。其中来自中国的研究“A Novel Anti-EGFR/CD3 Bispecific Antibody Exhibits Potent Efficacy for Osimertinib-resistant NSCLC”，主要探索了一种新型抗EGFR-CD3双特异性抗体BC3448在奥希替尼耐药NSCLC患者中的抗肿瘤效果。
医学界特邀该研究第一作者，同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科周彩存课题组的郭浩越博士与我们进行学术分享，深刻探讨研究设计背景、研究结果以及双抗药物在NSCLC领域的应用前景。
奥希替尼耐药困境，CD3双抗突出重围
奥希替尼目前是EGFR突变非小细胞肺癌（NSCLC）患者的首选一线治疗，且是EGFR TKI治疗进展的T790M阳性患者的标准二线治疗。奥希替尼虽然显示出高缓解率和持久的疾病控制，但是患者不可避免地会对治疗产生耐药。目前，约50%的患者产生奥希替尼耐药的机制仍不清楚，因此新的治疗方法迫在眉睫。
既往有研究表明CD3×DLL3双抗在小细胞肺癌中取得喜人的临床前结果。BC3448利用EGFR作为肿瘤特异性抗原，通过结合EGFR和T细胞表面CD3分子，BC3448通过同时结合肿瘤细胞上表达的EGFR和T细胞上的CD3将这两种细胞类型交联，形成免疫突触，通过促进T细胞活化，从而分泌炎症细胞因子和细胞溶解分子以杀死肿瘤细胞。
BC3448双抗采用了非对称的亲和力设计，其结合EGFR的亲和力较结合CD3的亲和力高两个数量级，这种非对称的亲和力设计旨在保证抗肿瘤活性的同时减少CD3可能引起的CRS副作用（细胞因子释放综合征）。此外，在体外也初步发现高剂量下CD3-EGFR双抗对奥希替尼耐药肿瘤的EGFR通路蛋白表达有一定的抑制作用。
临床前的优化尝试，BC3448脱颖而出
由此，周彩存教授团队尝试推进CD3双抗在非小细胞肺癌的应用，特别是解决EGFR突变型肿瘤三代靶向药耐药后线治疗这一临床难题，并在药物设计和临床前研究做了一系列优化尝试，包括：
该CD3-EGFR双抗由无锡智康弘义提供，在前期药物构建的过程中选用了IgG4亚型，降低CD3的亲和力和药物毒性；
临床前的动物模型选用具有完整髓系细胞分化的小鼠，尽量还原CD3-EGFR双抗在奥希替尼耐药NSCLC中应用可能出现的脱靶毒性和免疫抑制性细胞影响；
在多个模型中尝试CD3-EGFR双抗与多种药物的联用，通过多靶点联合阻断进一步刺激T细胞浸润、强化T细胞反应质量，进而放大CD3-EGFR双抗的疗效。
郭医生表示，这主要是基于CD3双抗的缺陷开展的研究，CD3双抗的工作效应主要基于T细胞功能，之前主要应用在血液瘤上。由于肿瘤抗原脱靶、实体瘤肿瘤微环境T细胞浸润低、实体瘤肿瘤微环境中的免疫抑制性细胞干扰T细胞功能等原因，因此CD3双抗在实体瘤的应用受限。
本研究主要体外研究模型为奥希替尼耐药细胞系（H1975-OR和HCC827-OR）。体外细胞毒性试验通过将 PBMC 与 A549、PC9、H1975、HCC827-OR 和 H1975-OR 在梯度浓度下共培养 3 天，然后用 CCK8 测定细胞活性。同时，在药物梯度浓度下，将 3 名健康供体的 PBMC 与 H1975 以 10:1 的比例培养 2 天，进行流式细胞术测定免疫细胞表型。高浓度药物处理耐药细胞2天后，并对EGFR通路蛋白表达进行WB定量分析。
体内模型主要采用了CD34+免疫重建的HuHSC-NOG-EXL小鼠，荷瘤后分别进行PBS空白对照、BC3448（0.3 mg/kg，biw）、抗PD-1（10mg/kg，biw）、抗CD3（0.3 mg/kg，biw）联合帕尼单抗（0.3 mg/kg，biw）四种给药。
美国获批IND，探索双抗多药联合
研究结果表明，BC3448 能明显促进 PBMC 介导的对所有 5 种细胞系的细胞杀伤作用（图 1A）。BC3448 对奥希替尼耐药的 HCC827-OR和 H1975-OR的 IC50 低于 A549、PC9和 H1975。
与对照组相比，用 BC3448 培养 2 天后，CD69+ 早期、CD25+ 中期、HLR-DR+ 晚期活化的效应 T 细胞（CD62L- CD45RA+ ）和 CD8+ 幼稚 T 细胞（CD62L+ CD45RA+ ）的比例显著增加（均 P<0.05，图 1B）。在高浓度下，BC3448 对表皮生长因子受体（EGFR）、pEGFR、JAK2 和 AKT 也有明显的阻断作用（图 1C）。在体内，BC3448 显著抑制了 A549 肿瘤的生长（P<0.05，图 1D）。
此外，BC3448将CD4+和CD8+ T细胞引导到肿瘤中，并刺激 CD4+ T 细胞上 CD69 和 Granzyme B 的表达以及 CD4+ T 细胞上 4-1BB 的表达（图 1E）。BC3448在更多肿瘤中的进一步体内实验正在进行中。
图1
根据以上结果，这款CD3-EGFR双抗目前正在同步开展I期临床研究，今年也在美国获批IND，相关研究数据将在未来进一步释放。
针对该项研究现今取得的成果，郭浩越博士表示：“目前多个临床前动物模型展示出了CD3-EGFR在奥希替尼耐药型NSCLC应用的潜力，未来我们计划继续细化临床前机制研究，期待能够通过多组学分析动物模型明确CD3-EGFR双抗单药和联合治疗杀伤奥希替尼耐药NSCLC的具体细胞或分子机制；另一方面，基于CD3-EGFR双抗的单药临床研究和多药联合的临床前数据，期待能够开展CD3-EGFR双抗多药联合临床研究。”
专家简介
郭浩越
同济大学附属上海市肺科医院
同济大学附属上海市肺科医院肿瘤科博士研究生
同济大学医学院肿瘤学博士研究生，师从周彩存教授。在校期间担任同济大学医学院研究生十一支部副书记、同济大学学生科协副主席等职务。博士生期间主要围绕肺癌精准诊疗问题开展相关研究，发表24篇SCI论文、1篇EI论文、2篇中文核心期刊。以第一共同第一作者发表sci论文8篇，相关成果入选WCLC、ESMO等国际学术会议，并获得同济大学研究生国家奖学金、同济大学优秀学生标兵、同济大学学术之星、“互联网+”大学生创新创业大赛同济大学金奖等荣誉称号。
审核专家：郭浩越博士
责任编辑：Sheep
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