打开网易新闻 查看精彩图片

1.实验动物：裸鼠

2.分组：

（1）正常4T1细胞注射裸鼠；

（2）特殊处理4T1（敲除或者过表达某基因/药物处理/低氧胁迫）细胞注射裸鼠

3.接种前器械及物品准备（所有物品消毒备用）

1）1ml一次性注射器

4.固定：一人左手大拇指食指轻轻抓住裸鼠的2个耳朵，右手向后方稍微拉紧尾巴，固定在操作台上。

5.接种： 接种者左手轻轻捻起要接种部位的皮肤，右手持1ml注射器平行于皮肤将针头插入皮下1ml，左右晃动下针头，没有什么阻力且看见针头在皮下移动，说明针头在皮下，此时将肿瘤细胞（1x107/只）注入到皮下，退出针头后用手轻轻按压针眼位置几秒，防止细胞流出。

6.检测：

（1）每3d统计体重和瘤径大小；

（2）30d处死取材，观察肿瘤转移部位；

（3）肿瘤组织WB检测；

（4）肿瘤组织免疫荧光/组化检测；

（5）肿瘤组织HE检测；

（6）肿瘤组织COIP检测；

7.结果展示

（1）肺转移发生：

打开网易新闻 查看精彩图片
打开网易新闻 查看精彩图片

（2）瘤径和体重变化趋势

打开网易新闻 查看精彩图片
打开网易新闻 查看精彩图片

结论：

A在注射细胞3d就开始皮下有肿瘤形成；

B在21一天左右出现肿瘤转移，转移出现在肺部；

C处理组和对照组相比，体重没有差异，但是肿瘤面积有轻微差异；

（3）WB检测例图

打开网易新闻 查看精彩图片
打开网易新闻 查看精彩图片
打开网易新闻 查看精彩图片