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本期文章引用格式：倪佳佳, 龙钰, 张丽, 杨青青, 刘义庆, 寇纯嘉, 李静怡, 李舒祺, 张海清. 生物素、异嗜性抗体、甲状腺激素自身抗体干扰甲状腺功能检测1例报道 [J]. 检验医学, 2023, 38(6): 599-602

整理发布已获《检验医学》杂志授权。

血清促甲状腺激素（TSH）和甲状腺激素是临床评价甲状腺功能的重要指标。当甲状腺功能检测结果与临床症状不符或TSH、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）的变化不符合规律时，除甲状腺激素抵抗（RTH）综合征等罕见疾病外，还要排除检测干扰物。

目前，干扰甲状腺功能检测的干扰物主要有以下4种：生物素、异嗜性抗体、甲状腺激素自身抗体（THAb）和巨TSH。

除此之外，还有抗钌抗体、抗链霉亲和素抗体等，但后2种干扰物的发生率较低，本案例未做排除实验。不同的干扰物确认方法有所不同。下图是我们总结的甲状腺功能检测干扰确认策略。

甲状腺功能检测干扰确认策略

本文主要通过报道1例由于生物素、异嗜性抗体、THAb干扰导致FT4、TSH同时升高的病例，阐述上述策略。

1 病例资料

患者，女，75岁，因甲状腺功能异常于2019年11月至山东第一医科大学附属省立医院就诊。患者18年前被确诊为桥本甲状腺炎（HT）、甲状腺功能减退症，服用左旋甲状腺素片（L-T4）治疗。2002—2019年，该患者TSH和FT4多次同时高于参考区间上限（图1），导致临床诊断困难，间断服用L-T4和甲硫咪唑近4年。

患者本次就诊检测甲状腺功能，结果显示TSH>100 μIU/mL，FT3（3.29 pmol/L）、FT4（12.7 pmol/L）均正常；甲状腺球蛋白抗体（TgAb）和过氧化物酶抗体（TPOAb）均阳性。患者除心悸外，无其他甲状腺疾病相关临床表现，既往患高血压、高脂血症，否认甲状腺疾病相关家族史。

2 甲状腺功能异常实验室验证结果

采集患者外周静脉血10 mL，进行THRβ基因外显子测序和甲状腺功能检测。结果显示，THRβ基因外显子测序无异常，排除RTH。

另外采用系统2、系统3分别再次检测甲状腺功能，结果见表1。怀疑患者体内有物质干扰了检测。

表1 不同检测系统FT4、TSH检测结果

01

鉴别异嗜性抗体干扰

为验证是否存在干扰，我们采用聚乙二醇（PEG）处理本例患者血清样本。用系统1复测经PEG沉淀后的血清样本，结果显示FT3基本不变（2.89 pmol/L），TSH（62.00 μIU/mL）和FT4（4.70 pmol/L）均明显降低。

将本例患者未经处理的血清与异嗜性抗体阻断剂共同孵育后，采用系统1检测，结果显示FT3（2.98 pmol/L）、FT4 （13.20 pmol/L），均正常；TSH（85.90 μIU/mL）虽然明显降低，但仍高于PEG沉淀后的结果和系统2的检测结果。因此，推测干扰TSH检测的物质可能不止1种。

异嗜性抗体是可以与人抗体结合的自身抗体。采用夹心法检测TSH，对嗜异性抗体更敏感；而FT4和FT3一般是采用竞争法测定，所以不易受异嗜性抗体的影响。当存在异嗜性抗体时，其会模拟TSH与捕获抗体、信号抗体连接，导致TSH假性偏高（图2）。PEG沉淀可以作为异嗜性抗体的筛查方法，异嗜性抗体阻断实验是确定异嗜性抗体存在的最佳方法。本研究在未经处理的患者血清中加入异嗜性抗体阻断剂后，患者TSH有所下降，证明存在异嗜性抗体，干扰了TSH的检测。

02

鉴别生物素干扰

采用新的TSH试剂（对生物素的耐受最高为1 200 ng/mL），在系统1上重新检测本例患者的TSH，结果显示TSH下降至67.6 μIU/mL，接近系统2和PEG沉淀后的检测结果。

生物素（维生素B7）是羧化酶的重要辅助因子。受检者摄入过量的生物素会干扰以生物素-链霉亲和素作为固相分离系统的免疫检测结果。根据检测原理（竞争法或夹心法）的不同，过量的生物素可能导致检测结果偏高或偏低。当采用夹心法检测TSH时，血清中过量的游离生物素占据了链霉亲和素磁珠的结合位点，导致与捕获抗体连接的生物素无法与之结合，造成TSH结果偏低（图2）。

但在本研究中，去除生物素干扰后，TSH水平明显下降。有研究发现，异嗜性抗体可与生物素相互作用，推测生物素引起的TSH假性升高可能是由异嗜性抗体与生物素相互作用（图2）所致。异嗜性抗体和生物素同时存在时，异嗜性抗体首先通过生物素固定在磁珠上，后与检测抗体结合或与捕获抗体-TSH-检测抗体复合物结合，最终导致TSH结果假性升高。

03

鉴别THAb干扰

为验证是否是THAb干扰FT4的检测，我们进行了放射性免疫沉淀实验（RIA）。结果显示，4种THAb均为阳性，其中抗T4-IgG抗体水平最高（31.24%，参考区间为0.00%~3.97%）。

THAb是可以与甲状腺激素结合的自身抗体，分为4种类型：抗T3 IgG、抗T3 IgM、抗T4 IgG、抗T4 IgM，其中IgG型抗体最为常见。THAb在正常人群中的阳性率为1.8%，而在自身免疫性甲状腺疾病中的阳性率为20%~40%。THAb是否干扰检测取决于所使用的检测方法。

采用使用一步法试剂的检测系统，如系统1、系统3检测甲状腺功能时，THAb可以与标记的甲状腺激素类似物结合，导致甲状腺激素假性偏高。而采用使用二步法试剂的检测系统，如系统2，加入示踪剂前所有的血清成分已被清除，因此检测结果不会受到血清中物质的干扰。

04

排除巨TSH干扰

为验证另一种干扰物是否为巨TSH，我们进行了125I-hTSH结合实验。结果显示，本例患者的检测结果（7 314 cpm）与对照者（无甲状腺疾病和风湿免疫性疾病的体检健康者）检测结果[（6 401±778）cpm]差异无统计学意义（P>0.05）。

以上结果提示患者血清中存在异嗜性抗体、生物素，共同导致TSH假性升高；还存在THAb，导致FT4假性升高。本例患者的真实检测结果应为FT4降低、TSH升高。因此，本例患者最终确诊为临床甲状腺功能减退症。治疗6个月后患者甲状腺功能恢复正常。

3 讨论

免疫分析法是临床检测甲状腺功能的首选方法，具有自动化程度高、周转时间短、特异性和灵敏度高等优点。但免疫分析法很容易受到非特异性干扰，导致产生假阳性或假阴性结果，干扰发生率为0.4%~4.0%。

免疫检测干扰不仅会导致甲状腺功能减退症患者不能及时得到治疗，还可能会通过影响心血管疾病的预后而影响患者的长期寿命。因此，快速、准确地识别免疫检测干扰非常重要。

综上所述，随着免疫分析技术的不断发展，检测方法的准确性越来越高，但仍然存在检测干扰。当甲状腺功能与临床表现不相符或TSH与甲状腺激素的变化不符合规律时，需考虑干扰物的存在。临床实验室应尽早确认是否存在干扰物，避免临床误诊、误治。

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编辑：笪文武 审校：方 琪