作者 | 杨梅

单位 | 广东省英德市人民医院

前 言

我国艾滋病感染患者人数逐年增加,因此早期诊断和发现人类免疫缺陷病毒(HIV)感染对预防HIV的传播及控制艾滋病的流行显得尤其重要。化学发光法检测人血清HIV具有比较高的灵敏度,自动化程度高[1],出结果时效比较快,能及时为临床提供依据进行早期预防交叉感染及职业暴露。化学发光法作为初筛实验方法有独特优势,但也有不足,因其敏感性高导致的假阳性也会相应增多。

案例经过

2023年09月17日上午,免疫室繁忙的工作正在如火如荼地进行,在审核一份来自外科住院患者的血液传播四项定量结果时,我停下来了,该患者的HIV抗体定量数值19.2,而正常参考范围是小于1,其值远远超过了此参考范围,是有反应的结果,按照中国疾病预防控制中心发布的《全国艾滋病检测技术规范》(2020年版)的要求,所有初筛有反应的样本,使用试剂2进行复检[2]。初筛是使用电化学发光法检测,我们复检用快速金标法进行检测,十分钟观察结果,在T线区有一条很模糊但又隐约可见的线。

图1 患者注射抗蛇毒血清后不足24小时的HIV抗体定量及快速结果

换一台设备重新上机,结果与初筛检测一样。当天同批次的HIV检测结果稳定,质控正常,排除系统误差的可能。LIS系统显示患者才两岁,没有以往就诊记录。

于是找一下同时抽的血,发现当天只有一支血型的血(EDTA抗凝),找了该支血的血浆做金标法快速,结果显示为阴性,究其原因有可能是EDTA抗凝是液体,把血浆严重稀释了而导致的“假阴性”。翻看患者病历发现还有两支前一天抽的血(此血为打抗蛇毒血清之前抽的),上机做定量,结果为0.379,金标法快速为阴性。

图2 患者注射抗蛇毒血清前血清的HIV抗体定量及快速结果

中午跟护士沟通,抽血有无对名字及输液同侧抽血,护士回复没有抽错患者,也没有输液。查看病历显示患者是蛇咬伤患者,前一天静脉注射了抗蝮蛇毒血清注射液。

图3 患者病例

注射完血清距离抽血时间还不够12小时,经过跟医生沟通,建议24小时后重新抽血检查,9月18日中午患者重抽的血送到我科,同事收到样本后,上机检测,结果显示为0.283。此案例中的患者HIV抗体是阴性的。

图4 患者的四项定量结果

案例分析

抗蝮蛇毒血清中含大量的高价抗蝮蛇毒抗体,与蝮蛇毒产生中和作用。抗蝮蛇毒血清的主要成分为经胃酶消化后的马蛇毒免疫球蛋白,对人体具有抗原性[3]。

目前我科使用的试剂虽然能同时检测HIV抗原及抗体,但所使用的仪器无法区分抗体和抗原。

笔者查阅文献的分析,影响化学发光法准确性的主要原因有以下几点:1.标本性状的改变;2.血清中存在其他抗体的干扰,包括RF,补体、嗜异性抗体,各种自身抗体[4]。笔者观察患者标本血清分离清楚,无溶血,无黄疸,无乳糜排除第1点。患者既往体健,肝肾功能也正常,无自身免疫性疾病。生化检测项目结果见下图:

图5 患者生化检测结果

本例患者我们经与临床沟通以及本专业高年资主管沟通,一致认为可能是由于抗蝮蛇毒血清注射液含大量免疫球蛋白抗体,使人体血液的免疫球蛋白突然大量增多,加上有可能抗血清与HIV试剂包被用抗原及标记用抗原置备过程中纯度及片段选取的特异性有同源性,产生交叉反应而导致的假阳性。36小时后可能由于患者体内的高价抗蝮蛇毒抗体与蝮蛇毒产生中和作用,被消耗了,血液中免疫球蛋白基本恢复到注射抗血清前的状态,所以再检测血清中的HIV抗体就没有足够量的抗体进行交叉反应了。

总结与心得

化学发光法因高灵敏度在免疫室应用广泛,遇到一些可疑的检验结果时,我们需排除样本异常状态,复查样本并排除由于操作不当或者设备状态异常导致异常结果,需要分析其检测方法学可能由于干扰物质引起的假阳性,善于利用另外方法学合并检验。排除了检验自身的因素后加强与临床有效沟通,提供给临床更准确的检验报告。

专家点评

黄清容 广东省英德市人民医院检验科 副主任技师

作者对可疑检验结果,有敏感的洞察力,善于思考,有善于解决问题的能力,对发出的检验报告谨慎认真负责。案例也提醒我们检验人不能完全依赖仪器,在遇到结果可疑时,要多方面寻找原因,特别要加强与临床的有效沟通,才能发出准确的报告,这样不仅能提升自身的地位,而且还可以为患者的早期诊断和治疗贡献一份力量。

参考文献

[1]高平.四种HIV抗体检测方法的对比分析.临床医药实践 2019年5月第28卷第5期

[2]中国疾病预防控制中心全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS(2020年修订版)

[3]陈士昌.李东伟.刘双.高妍.抗蝮蛇毒血清治疗丹东地区蝮蛇咬伤疗效观察.临床军医杂志.2019年11月第47卷第11期

[4]张云燕,仇卫民,江春梅。一例肝癌患者磁微粒化学发光+HIV+假阳性分析。国际检验医学杂志.2016年12月第37卷第23期

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编辑:徐少卿 审校:陈雪礼