根据牛出生时间和血清采集分离方法分为:
✔ 胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS):胎牛血清是指怀孕3-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏密闭穿刺采血后,通过一系列工艺处理最终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子会自动消失。
✔ 新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS):出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清。
✔ 小牛血清(Calf Serum):出生后3天至6月龄小牛动脉采血分离血清。
✔ 成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)指的是屠宰时收集全血后分离得到血清。
组份与比例不同:
两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。
用途与用法不同:
某些细胞必须胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃。解冻血清时,推荐我们总结出来的三步法(见下表),可预防沉淀发生。不推荐血清4℃过夜融化,更不能直接将冷冻的血清放入37℃水浴或者温箱中。因为血清在融化时,蛋白先融,冰块后融,局部蛋白浓度过高,易发生沉淀。血清在解冻后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
温度 100ml血清 500ml血清
第一步 室温 35分钟 90分钟或15-20℃水浴 5分钟 18分钟
第二步 20℃水浴 15分钟 25分钟
第三步 37℃水浴 20分钟 35分钟
注意:在水浴过程中,血清的液面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动,使血清混匀,但不要产生泡沫!
温馨提示:目前常见的血清品牌有:Ausbian、Gibco、Hyclone、Homeland、MBC等品牌,其中MBC胎牛血清是目前国内实验中常用的胎牛血清,高品质,让细胞培养的更健康,实验数据也更稳定。
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