方法检索教程
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控制实验动物房环境温度保持22℃~24℃，相对湿度保持50%~60%。设置动物房12小时光照与黑暗循环交替系统，模拟昼夜交替。保持实验环境洁净，定期更换饲料及鼠笼消毒。选用卵巢摘除手术法，其原理是用手术方法摘除卵巢，人为模拟人类在围绝经期时性激素水平失衡的特点，可直观地体现雌激素撤退后对全身各系统的影响，更能反映该病的特点，卵巢摘除手术的实验周期短，对实验鼠的月龄要求不高，故大部分研究者选择此法进行造模。
制备去卵巢模型
卵巢去势法随机选取20只2月龄雌性ICR小鼠，设为卵巢去势组，小鼠手术前禁食禁水12h，减少麻醉及术后不良反应。小鼠取侧卧位固定四肢，充分暴露小鼠背侧及腹侧皮肤。手术区域备皮，使用碘伏消毒手术区域三遍。在小鼠腰椎两侧做1cm左右的手术切口，手术镊固定切口皮肤，打开肌肉层，进入腹腔定位卵巢。在成功结扎输卵管后，行卵巢切除。检查腹腔内无出血及异物后，采用间断缝合法按层缝合伤口，关闭腹腔。手术区域再次消毒。SHAM组和DM组相同的手术步骤，但仅牵拉卵巢不切除。予戊巴比妥钠按30mg/kg给予麻醉，麻醉状态下摘除双侧卵巢，8000u/mL浓度青霉素G钠溶液冲洗腹腔并缝合，术后恢复3d，期间用肌肉注射青霉素4万U预防感染，术后第4天起逐只进行阴道涂片检查，以确定卵巢切除完全和进行模型评价。另10只2月龄小鼠作为青年对照组。手术全过程严格遵循无菌操作，小鼠术后休养一周，进行后续实验。
选择3月龄成年大鼠和8周龄小鼠作为双侧卵巢切除术的实验对象。有资料显示该年龄大鼠或小鼠进入成熟期，性周期处于稳定状态，卵巢内分泌功能已经完善，可作为实验用鼠；若此时摘除双侧卵巢会导致大、小鼠体内的激素水平显著下降，继而引发围绝经期综合征。
评价指标分析
1
动情周期及动情频率变化
青年对照组小鼠动情周期规则，呈现动情前期(有核上皮细胞)、动情期(角化上皮细胞聚集)、动情后情(有核上皮细胞、角化上皮细胞、白细胞并存)、动情间期(大量白细胞，偶见角化及上皮细胞)，4～5d为一性周期且规律出现。自然衰老组与卵巢去势组小鼠经阴道涂片观察发现，动情周期出现紊乱，各期并不规律出现，直至动情周期延长，以动情间期逐渐延长为主，大量白细胞的阴道涂片占多数，7～8d甚至10多天为一个性周期，有统计学差异，动情频率(次/周)明显减少，有统计学差异。相比卵巢去势组，自然衰老组动情周期相对延长，有统计学差异，动情频率明显减少。
2
卵巢去势模型实验应用研究
小鼠卵巢切除术（OVX）后，一系列由卵巢分泌的生殖激素含量降低，激素的中枢调节器也随之衰竭，从而导致小鼠进入类绝经期活动状态。夏先锋等将C57BL/6雌性小鼠卵巢摘除后，通过4周的慢性不可预知温和应激法（OVXCUMS）+睡眠剥夺，观察该模型的行为学和神经内分泌的变化发现，卵巢去势小鼠展现类绝经状态，行为学实验结果提示小鼠呈抑郁状态，为围绝经期抗抑郁药物活性筛选提供重要依据。
在制备复合模型过程中，大部分文献选择双侧卵巢摘除手术联合慢性不可预知刺激和自然老化联合慢性束缚刺激的方法制备动物模型。此外，多数研究者从病因发展过程出发，在双侧卵巢摘除或自然衰老的基础上，采取加入外部刺激的方式模拟PS女性患者受到的社会压力或刺激的特点，建立围绝经期精神神经症状模型。
3
卵巢切除对小鼠子宫重量影响
观察小鼠子宫外形发现，SHAM组小鼠子宫形态饱满，弹性较好，呈肉粉色。较SHAM组相比，手术切除双边卵巢的分组（OVX组、O+D组、L-PF组、H-PF组）小鼠子宫外形有明显萎缩，伴有子宫形态不规整，弹性较差，颜色灰暗的现象。
Fig1 各组小鼠子宫形态
文献引用
1.A Clinical Study of the Effect of Estradiol Valerate on Sleep Disorders, Negative Emotions, and Quality of Life in Perimenopausal Women[J]. Zhang Jianfu;Shao Shurong;Ye Chaohui;Jiang Bengui.Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,2021
2.詹均毅,马娴,傅萍.围绝经期综合征中医疗法的动物实验及临床研究进展[J].浙江中西医结合杂志,2022,32(12):1168-1171.
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5. 去势法联合慢性不可预知性温和应激法建立围绝经期综合征肝郁证动物模型的研究[J]. 阮璐薇;张鹏横;黄睿婷;沈建英;梁文娜.中华中医药杂志,2021(01)
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