外泌体被认为具有细胞间信使的功能，可在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子，已成为国自然的热门话题。在应用层面，外泌体在 2024 年最火热的领域是什么？课题思路怎么设计？在实操层面：怎么提升外泌体得率？怎么提升提取的外泌体纯度？怎么保持外泌体的活性？怎么大规模提取外泌体？

丁香园与宇玫博生物合作推出「外泌体进阶必备宝典」，包含了丰富全面的教学视频、protocol、问题解析和干货文章，教你快速获取和提纯外泌体。除了血液、血液、尿液等外泌体提取纯化操作视频教学外，还提供了超滤浓缩、 MSC 培养、肿瘤/T 细胞培养操作视频！还有高分 SCI 文章思路、TEM 操作图解、NTA 检测图解等内容，硬核干货帮你揭开外泌体世界奥秘！

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手册内容抢先看

8 个教学视频 + 7 个 protocol 讲透实战操作

专题内展示了各种外泌体提取以及 MSC 细胞、肿瘤细胞/T 细胞培养操作视频。此外还有丰富的外泌体纯化操作 protocol，无论是从尿液体液，还是组织血液全部一网打尽，全方位提供外泌体相关实验室实战经验，跟着做，绝没错！

10+ 篇图文解读开拓思路

专题内还有 10+ 篇图文解读，多篇高分文章助力各种疾病领域应用研究，包括心血管疾病、糖尿病研究、癌症疗法等。专题内也提供了外泌体全新的样本制备指南，以及作为药物递送载体，外泌体最新研究进展和常见问题解析（如：如何大规模提取）。此外，我们还将为您解答用 qPCR 检测外泌体常见的问题如：提取方法、RNA 定量方法、CT 值较大是否属于异常......

满满干货帮您一站式解决外泌体难题，以下是血液外泌体的样本制备方法：

外泌体血液样本提取时，血清和血浆都可以正常提取。如果提供全血，是无法完成的，必须提前做好血清或者血浆的分离。以下是全血、血浆、血清的区别：

1

全血：通过采血管采集后，经过抗凝处理的全部血液。

2

血浆：经过抗凝处理的全血，进行低速离心后的上清液，为淡黄色液体。

3

血清：不经过抗凝处理的血液，让它自行凝固，再进行低速离心后的上清液，为淡黄色液体。

全血经过长时间放置，或通过冷冻、或高速离心后，会发生溶血，此时无法提取外泌体。一定要提前做好血清或者血浆的分离，并且采血后尽快进行分离，期间不能经过冷冻，离心时转速不可太高，离心后取上清即可，发生溶血的样本应丢弃。因血液在凝血过程中血小板受到刺激会产生大量外泌体，因此若需要排除血小板外泌体的影响应采用血浆进行外泌体提取检测。具体血液样本操作如下:

1

采血时间一般为早晨或上午；

● 血浆：将抗凝管收集的全血 2 mL，轻柔上下颠倒混匀；

● 血清：收集不加抗凝剂的全血 2 mL，加入到离心管或促凝管中，凝血后进行下一步离心；

2

在 1 小时（室温条件下）或 2 小时（4 ℃ 条件下）内进行下面的操作：4 ℃，1,900 g 离心 10 分钟；

3

吸取约 1 mL 上清转至洁净的 1.5 mL 离心管中，16,000 g，4 ℃，离心 10 分钟，小心吸取上清到新的离心管中；

4

放入 -80 ℃ 冰箱中保存；

5

填写样本登记单，记录样本名称、类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。

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内容策划：王丹琦

内容审核：吴军

题图来源：图虫创意