作者 | 丁磊1，李莉2
单位 | 1.苏州市吴江区儿童医院；2.复旦大学附属华山医院
一、专业至上
4月的上海春风拂面，阳光明媚，中午下班走在去医院食堂的路上发现一片奇怪的植物，嫩绿的叶子上形成一团团白色丝状物质。通过植物识别类软件判断这是一种名为“八宝”的草本植物，出于检验科微生物方面的职业敏感性，感觉白色丝状物质像是真菌，为了验证自己的判断，便摘了一片带回了实验室进行相关“实验室检测”。
二、实验室检测
首先在生物安全柜内将叶子上的白色丝状物质涂片进行真菌荧光检测，果然在显微镜下看到了许多粗壮的菌丝，如图1-2所示。但为了搞清楚到底是什么类型的真菌，决定对其进行真菌培养，于是立即将叶子上的白色丝状物质接种到SDA培养基上，放置在28℃温箱中培养。
图1 制作荧光染色涂片
图2 荧光染色镜下真菌形态
对于这种未知的真菌，我们心里也不知道最终能不能鉴定出来，于是开启了漫长的等待时光。在此期间我们多次对长出的菌体进行质谱测定，但结果均为结果不置信或分值过低，在第5天时SDA平板上长出了大量灰黑色菌体。
虽然质谱鉴定结果分值偏低，但这也给了我们继续鉴定下去的信心，如图3-4所示。于是我们进一步对优势菌株分纯到新的SDA培养基上继续培养，3天后得到了分纯后的菌体，菌体在SDA培养基上呈绒状或棉絮状，灰黑色，如图5-6所示。接下来就是对分纯后的菌体进行涂片镜检和质谱检测。
图3 SDA培养第5天菌落形态
图4 质谱鉴定低分结果
图5 SDA分纯后第3天菌体形态（正面）
图6 SDA分纯后第3天菌体形态（反面）
三、鉴定结果
激动人心的时刻到了，KOH（10%）涂片镜下查见砖格状分隔的棕色大分生孢子，表面粗糙，顶部有一鸟嘴状突起的喙，短柱状，有水平、垂直或斜形分隔。分生孢子少分枝、直立或弯曲，呈倒棍棒状，大小约(25～40μm)×(10～20μm)；质谱鉴定结果为互格交链链格孢，结果评分为2.16分（参考结果≥2分）。如图7-8所示。
图7 KOH涂片镜下真菌形态
图8 质谱鉴定结果(互格交链链格孢)
四、查阅资料
链格孢(Alternaria alternata)又名链互格孢、交链孢霉，为半知菌亚门、丝孢菌纲、暗色孢科、链格孢属。分布于世界各地，是一种户外真菌，在环境中存在率很高。它的最佳温度约为21°C，但它可以在2~32°C、湿度大于84%的条件下生存。链格孢属孢子被认为是致敏空气过敏原中最丰富和最有效的来源之一，并且链格孢致敏在对真菌过敏的患者中最为普遍，其孢子在温暖干燥的空气中传播，在温热夏季达到最高水平[1-2]。
链格孢除了致敏外还能够引起多种感染，其中一些具有致命性。常见报道的致病菌有交链格孢和侵染链格孢两个种，其中交链格孢最为常见。通常累及免疫受损患者，尤其是器官移植患者，但偶尔也会累及免疫正常的人群。除皮肤感染外，链格孢尚可导致眼睛真菌病、鼻窦炎、甲真菌病，其中皮肤感染最为常见，多因为外伤接触该菌而感染[3]。人感染链格孢病较罕见，但近年来报道明显增多[4-6]。因此链格孢必须引起我们足够的重视。
一旦感染链格孢，治疗比较困难，尽管许多疗法和多种抗真菌药物曾用于治疗本病，但目前尚无最佳方案。且本病患者多伴有基础疾病，因此在抗真菌药物治疗的同时应改善全身状况，如减少糖皮质激素用量等。
五、总结
综上所述，我们能推断出这种叶子上的互格交链链格孢菌是可能感染人类的，必须引起我们的重视。首先我们应与此类病原保持一定距离，避免吸入致敏或感染；其次要避免被已患病的叶子划伤，或者当身体有皮肤外伤时，切勿采摘触碰此类已患病的叶子；最后我们可以通过强身健体，增加自己的免疫力，来抵抗此类外来真菌的感染。
专家点评
复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室 章强强主任技师
链格孢是常见存在于环境中条件致病性真菌，在实验室中多被认为是污染菌，也是暗色真菌的一种。该菌的镜下特征为砖格状分隔的棕色大分生孢子，较易鉴别。在机体免疫力降低的情况下，该菌可以侵袭人体器官，导致感染。已有文献报道链格孢可通过伤口引起皮下组织脓肿和溃疡，导致皮肤着色真菌病、足菌肿等，还可引起眼部、骨骼的感染，导致角膜炎、骨髓炎等。通过吸入链格孢的孢子可以导致呼吸道的过敏。在免疫抑制患者中还可引起肺部感染，以及播散性的暗色丝孢霉病。所以，我们还是要引起重视。
参考文献
[1] Gabriel MF, Postigo I, Tomaz CT, et al. Alternaria alternata allergens: Markers of exposure, phylogeny and risk of fungi-induced respiratory allergy[J]. Environ Int, 2016,89-90:71-80.
[2]López Couso VP, Tortajada-Girbés M, Rodriguez Gil D, et al. Fungi Sensitization in Spain: Importance of the Alternaria alternata Species and Its Major Allergen Alt a 1 in the Allergenicity[J]. J Fungi (Basel), 2021,7(8).
[3]李若瑜主编.医学真菌学.北京：人民卫生出版社，2023年8月第2版.276.
[4]Crișan M, Țoc DA, et al. First Reported Case of a Clinically Nonresponsive-to-Itraconazole Alternaria alternata Isolated from a Skin Infection of a Nonimmunocompromised Patient from Romania[J]. J Fungi (Basel), 2023,9(8).
[5]Ferrándiz-Pulido C, Martin-Gomez MT, Repiso T, et al. Cutaneous infections by dematiaceous opportunistic fungi: Diagnosis and management in 11 solid organ transplant recipients[J]. Mycoses, 2019,62(2):121-127.
[6]Jebari M, Mtibaa L, Abid R,et al.. Unusual location of cutaneous alternariosis in an immunocompetent patient. IDCases. 2021 Dec 6;27:e01356.
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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼
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