以下是一些可能会影响薄膜过滤法结果的因素:

一、滤膜质量与特性

  1. 滤膜的孔径大小:如果滤膜孔径不均匀或超出规定的孔径范围,可能导致一些本应被截留的微小微生物透过滤膜,造成漏检,使检测结果偏低。
  2. 滤膜的材质:不同材质的滤膜对微生物的吸附能力不同。某些材质可能会吸附样品中的微生物,使得最终培养得到的菌落数减少,影响结果的准确性。
  3. 滤膜的完整性:滤膜在使用前如果存在破损、裂缝或者安装不当导致的缝隙,会使部分样品未经过滤膜的有效截流直接通过,导致检测到的微生物数量低于实际数量。

二、样品特性

  1. 样品的粘度:高粘度的样品在过滤时过滤速度缓慢,容易堵塞滤膜孔隙,不仅影响过滤效率,还可能导致微生物在滤膜表面或内部不均匀分布,或者部分微生物被包裹在黏性物质中无法与培养基充分接触,影响微生物的生长和检出。
  2. 样品中的抑菌成分:如果样品中存在抗生素、防腐剂、消毒剂等抑菌成分,在过滤过程中这些成分可能会随着样品一同通过滤膜,抑制滤膜上微生物的生长繁殖,导致菌落形成数量减少,使检测结果低于实际含菌量。
  3. 样品的酸碱度:过酸或过碱的样品可能对微生物的活性产生影响,降低微生物在滤膜上的存活能力,进而影响培养后的菌落形成和计数。

三、过滤操作过程

  1. 过滤压力:压力过大可能会导致滤膜破裂;压力过小则会使过滤速度过慢,甚至造成样品过滤不完全,都会影响检测结果。
  2. 过滤速度:速度过快可能使微生物受到机械损伤,或者造成滤膜堵塞不均匀,影响微生物在滤膜上的分布;速度过慢则可能使微生物在过滤过程中发生变化,如活性降低、死亡等。
  3. 过滤时间:过滤时间过长,可能使微生物在过滤过程中因干燥、环境变化等因素受到损伤,影响后续的培养和生长;过滤时间过短则可能导致样品过滤不充分。

四、冲洗过程

  1. 冲洗液的种类:不同的冲洗液对去除样品中的抑菌成分和杂质的效果不同,如果冲洗液选择不当,无法有效去除抑菌成分,会抑制微生物生长,影响结果。
  2. 冲洗液的体积和冲洗次数:冲洗液体积不足或冲洗次数过少,可能无法充分去除样品中的抑菌成分和杂质;而冲洗液体积过大或冲洗次数过多,可能会将截留在滤膜上的部分微生物冲走,导致检测结果偏低。

五、培养条件

  1. 培养基质量:培养基的营养成分、pH 值、凝固度等不合适,可能导致微生物生长不良,影响菌落的形成和计数。
  2. 培养温度和时间:培养温度过高或过低,培养时间过长或过短,都可能导致微生物生长状态异常,使菌落数量与实际含菌量不符,从而影响检测结果。

六、操作环境

  1. 无菌操作:如果在过滤、贴膜、培养等过程中未能严格执行无菌操作,可能会引入外界杂菌污染,导致检测结果偏高。