作者 | 陈学丽
审核 | 李文瑞
单位 | 东莞市第九人民医院
前 言
在ABO血型鉴定试验中，导致正反定型不符的原因非常复杂，准确鉴定ABO血型是输血工作的基础，也是医疗安全、有效输血的重要保障，如果出现正反定型结果不符，不能轻易按照正定型或反定型的结果确定血型，应进行系统全面地分析，查明引起正反定型不一致的原因，准确地判定ABO血型，确保输血安全。
案例经过
患者，男性，56岁，有冠心病、高血压、糖尿病病史，采集EDTA抗凝管检测血型，用试管法正定型为O型RhD阳性，反定型A1c为1+、Bc4+，依反定型表现，凝集强度应≥2+才是正常抗体表达，那么正反定型结果不一致？
为排除操作失误等因素，按照第四版《全国临床检验操作规程》要求，在4℃和37℃分别用试管法和凝聚胺法进行血型复检操作，两种方法结果几乎一致，都有一管强凝集，一管弱凝集，详见下表：
结果分析
1.若血型为O型，患者血浆的抗A抗体表达减弱？
2.若血型为Aχ型，弱A抗原未被检出，血清有不规则抗A抗体存在？
需进一步做补充试验来确认。
实验一：
实验结果表明患者红细胞表面含有H抗原，与正常Oc相比凝集强度无差别。
实验二：
反应表格结果显示，温度对反定型A1c凝集强度影响不大，但是增加患者血浆量（即加大抗体浓度）使反定型A1c凝集强度增大，表明了患者血浆中存在抗A抗体表达减弱现象。
实验三：
1.0.9%生理盐水5mL+患者红细胞1mL，洗涤3遍，最后一遍移除所有的上清液，留洗涤红细胞待用；
2.筛选出健康人群O型RhD阳性（意外抗体和自身抗体阴性）EDTA抗凝血4份，以1500g离心力离心1分钟，离心后分别收集血浆（血浆含有抗A抗B和抗AB抗体）500uL（总共2mL），加入到已洗涤的待测红细胞试管中；
3.将混合试管放在37℃孵育1小时，期间不时摇晃混匀。转至4℃过夜，第二天以1500g离心力离心1分钟收集红细胞，摒弃上清液。
4.将红细胞转移至另一只新试管中，使用0.9%生理盐水（4℃，5mL）洗涤4-5次，留取部分最后一次的洗涤上清并平行检测；
5.将洗涤后红细胞试管放置56℃水浴箱30分钟回收ABO抗体；
6.将收集到的上清液和未次洗涤液，立即与A1型、O型红细胞按2:1比例混合，记录肉眼结果，接着放置显微镜下查看结果。
显微镜下结果如下图：
四组检测结果均为阴性。最后一次洗涤上清液均不与A1、O型细胞反应，表明待测红细胞已不含游离抗A抗体，试验有效。放散液与A1、O型细胞反应结果为阴性，说明放散液中未释放出抗A抗体，待测红细胞不表达弱A抗原。
案例分析
通过以上三个实验分析，反定型Oc与自身对照实验阴性，表明了患者无自身冷抗体，无ABO系统以外的完全抗体。由于各种ABO系统血型与抗H(效价1:128)反应强度为:0细胞4+，A1细胞1+，A2细胞3+，B细胞2+，AB细胞1+，即抗H强度排序为:O>A2>B>A2B>A1>A1B，实验一结果表明待测红细胞与正常Oc表达的H抗原强度一致，排除孟买血型，间接排除A亚型的可能，实验二与实验三结果则表明该患者抗A抗体表达有所减弱而无弱A抗原表达，综合上述血型血清学检查，可以初步判定患者ABO血型与正定型结果一致，为O型。
通常抗原抗体减弱的原因有以下几种:
结合病史，该患者56岁，无输血史，无其他特殊病史，但有常年糖尿病、冠心病基础疾病，考虑可能是年龄大加疾病因素导致体内抗A抗体表达减弱，若该患者需要输血可以输入O型RhD阳性血液。
总 结
在日常血型鉴定中，A亚型往往容易误定为O型，如果给弱A亚型的患者输入O型血，不会有太大问题，但是如果把弱A亚型误定为O型，并输给O型人，则会引起血管内溶血性输血反应。因此，应避免将弱的A亚型定为O型。吸收放散实验是辅助证明弱A弱B抗原的重要实验，另外一般用人O型血浆来制备高效价的抗A、抗B和抗AB抗体，适用于辅助检测弱A弱B抗原。在ABO血型检查时，一定要做正反定型，这样可以最大限度地减少血型错误避免严重输血反应。
参考文献
《输血相容性检测及凝难案例分析》
说明：本文为原创投稿，不代表检验医学新媒体观点。转载时请注明来源及原创作者姓名和单位。
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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼
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