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野生型AB品系成年斑马鱼在循环水系统中饲养,水温维持在28.5摄氏度,采用10小时黑暗/14小时光照周期,符合标准。水族箱中的循环水通过反渗透过滤(pH值7.07.5)。斑马鱼每天喂食两次实验室培养的盐水虾。在行为测试中,使用大约67月龄的成年斑马鱼。氯化锌对斑马鱼的毒性测试分为急性毒性测试和慢性毒性测试两部分:
1、急性毒性测试:
确定半数致死浓度(LC50),即导致一半测试斑马鱼死亡的氯化锌浓度。
分组:将斑马鱼分成每组14只的小组。
饲养条件:在3升水族箱中饲养。
暴露浓度:使用2、4、6、8、10、12和15 mg/L的不同浓度氯化锌。
暴露时间:分别在24、48、72和96小时后观察斑马鱼的生存情况。
2. 慢性毒性测试:
评估长期暴露在较低浓度氯化锌下对斑马鱼的影响。
选择0(对照组)、0.1、0.5、1和1.5 ppm的氯化锌浓度。
暴露时间:进行24小时急性暴露、96小时亚慢性暴露和21天慢性暴露。
饲养条件:整个实验期间,斑马鱼禁食,并且每天更换暴露水。
行为测试:对所有组的斑马鱼进行一系列行为测试,包括3D运动、捕食者回避、记忆、攻击性和昼夜节律,并比较氯化锌处理组与对照组的表现。
健康的成年斑马鱼被分成每组14只,年龄在6至7个月之间,并在3升水族箱中饲养,准备接受处理。为了确定LC50(半数致死浓度),使用了以下氯化锌浓度:2、4、6、8、10、12和15 mg/L,暴露时间为24、48、72和96小时。
急性毒性测试是在不同的氯化锌浓度(2、4、6、8、10、12和15 mg/L)下进行的,从低到高浓度,并在24、48、72和96小时的暴露后进行。在整个暴露实验过程中,未处理的对照组没有发生死亡。在2 mg/L或更低浓度的ZnCl2孵化的成年鱼显示出与对照组相似的死亡率,而在15 mg/L处理的鱼在孵化后24小时有100%的死亡率。LC50是根据每个ZnCl2浓度下不同暴露时间的鱼死亡率百分比计算得出的。ZnCl2的96小时LC50估计约为6 ppm。
参考文献:
Sarasamma S, Audira G, Juniardi S, Sampurna BP, Liang ST, Hao E, Lai YH, Hsiao CD. Zinc Chloride Exposure Inhibits Brain Acetylcholine Levels, Produces Neurotoxic Signatures, and Diminishes Memory and Motor Activities in Adult Zebrafish. Int J Mol Sci. 2018 Oct 16;19(10):3195.
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