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血液样本
  • 血清:是 ELISA 实验中常用的样本类型之一,采血后将血液标本室温放置 2 小时或 4℃过夜,使血清析出,再 4℃、1000×g 离心 20 分钟,仔细收集上清即可。血清中含有丰富的抗体和其他生物分子,适用于多种疾病的诊断和检测。
  • 血浆:用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后 30min 内 4℃、1000×g 离心 15min,取上清即血浆。血浆中含有各种蛋白质、激素和其他生物活性物质,可用于多种生物标志物的检测,但要注意避免使用溶血或高血脂的标本,同时需根据试剂盒要求选择合适的抗凝剂。
细胞相关样本
  • 细胞培养上清液:在细胞培养过程中收集的培养基,其中包含了细胞分泌的各种蛋白质、激素和其他生物分子,适用于研究细胞功能、信号传导等生物学过程。取细胞培养上清到离心管,1000×g 离心 20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或 - 80℃保存备用。
  • 细胞裂解液:需先吸去培养板内的培养基,用消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来,收集细胞悬液,1000×g 离心 10min,弃去培养基,用预冷的 PBS 润洗 3 次,再加入适量的预冷 PBS 或细胞裂解液重悬细胞,通过反复冻融或超声破碎等方法使细胞充分裂解后用于检测。

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组织样本
  • 一般需制成组织匀浆,具体步骤为取适量组织块,于预冷 PBS 中清洗去除血液,称重备用,组织块较大需先剪碎再匀浆,可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果,如玻璃匀浆器研磨、超声破碎或反复冻融等,最后将制备好的匀浆液于 9000×g 离心 9 分钟,留取上清即可检测,若样本需长期保存,可添加蛋白酶抑制剂。
其他生物液体样本
  • 尿液:其成分相对简单,可直接离心取上清进行检测,但需注意尿液中的某些成分可能会影响检测结果,如尿素等,且不同的检测指标对尿液样本的处理方法可能略有不同。
  • 唾液:采集方便,其中含有一些与口腔健康、疾病相关的生物标志物。采集后需离心去除杂质,然后可直接用于 ELISA 检测,但同样要注意样本的保存条件和可能的干扰因素。
  • 脑脊液:是一种存在于脑室及蛛网膜下腔的无色透明液体,对神经系统疾病的诊断具有重要意义。采集时需进行腰椎穿刺等专业操作,采集后离心取上清,由于其样本量通常较少,在检测时需注意加样量的准确性。
  • 胸腹水:在一些疾病状态下,胸腔或腹腔内会积聚液体,胸腹水样本中含有与疾病相关的蛋白质、细胞因子等生物分子。采集后离心取上清,可用于相关疾病的辅助诊断和病情监测。
  • 肺泡灌洗液:通过支气管镜向肺泡内注入生理盐水并回收得到,其中含有肺泡表面活性物质、细胞成分及各种生物活性物质,可用于肺部疾病的研究和诊断,采集后需离心去除细胞碎片等杂质,取上清进行检测。

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