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珍妃被投入井时，据目击者溥偀贝勒称，光绪帝当时就在旁边，唯有默默垂泪，未敢为其求情。投井执行者为太监崔玉贵与王德环。1900年8月14日，溥偀贝勒二十二岁之际，紫禁城陷入混乱。皇太后与光绪皇帝皆更换衣衫，准备逃离，因洋人即将攻入。慈禧太后亲率珍妃及御前首领太监崔玉贵、王德环至乐寿宫，将珍妃自北三所提出。

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慈禧太后将珍妃从冷宫提出后，先命人予以训斥，而后以带走珍妃不便且恐其生事有损皇家颜面为由，命太监打开乐寿堂前井盖，令珍妃自尽。珍妃时年二十四岁，正值青春，自然不肯从命。慈禧太后见珍妃不从，又加训斥。随后，珍妃伏地，不停哀求哭喊：“亲爸爸，亲爸爸，饶过奴婢吧。” 继而，慈禧太后愤怒高呼：“去死吧！” 此时，光绪皇帝在侧默默流泪，珍妃亦哭泣不止，然无人为珍妃求情。慈禧太后甚为恼火。太监崔玉贵以踏脚毡子蒙住珍妃头部，拖往井边。珍妃边骂边挣扎，然终不敌太监，瞬间被崔玉贵抱起，头朝下、脚朝天，只听砰然一声，珍妃殒命，怨气冲天。此井后被称为珍妃井。

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其后，西逃途中的慈禧太后常夜不能寐，常梦到珍妃呼喊其名。于是，1901年，慈禧太后派崔玉贵将珍妃遗体捞起。然珍妃已在井中浸泡一年有余，早已膨胀变形。接着，内务府置办棺材，将其遗体装殓入棺，简单潦草葬于阜成门外恩济庄宫女墓地。两年后，在瑾妃要求下，宣统帝溥仪将珍妃迁葬至光绪崇陵妃园寝。1921年，溥仪以 “珍妃温恭夙著” 为由，追谥其为恪顺皇贵妃。