支原体污染一直是细胞培养的一颗「定时炸弹」，由于前期发生时较难被观测，往往在发现时就已经来不及了。这次小王的实验室又遇到了支原体感染危机，他不断复盘试图找到真正原因：
这么贵的细胞，也是正规渠道购买！收到的「心肝宝贝」肯定不会有污染！
严格执行「无菌操作」，多样本处理也做好了隔离和标记，不存在交叉污染！
那就可能是……细胞培养基/血清被污染了！
经过排查，这次感染的「罪魁祸首」，居然是这次培养使用的血清中含有支原体。那如何才能防范培养基/血清源头发生的支原体污染呢？如何选择高质量血清/培养基？本文整理 3 点容易被忽视因素，祝大家实验顺利。同时，我们还准备了有奖调研，点击此处参与或文末完成问卷，即有机会赢折叠烧水壶、定制卫衣、京东卡等150 份惊喜好礼！
细胞培养中，细胞培养基应用成分、培养基 pH 值、培养条件等都影响着细胞培养的效果。
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关注血清质量
血清为细胞生长提供必需的基本营养物质、激素和各种生长因子，以及结合蛋白等物质维持细胞生存环境，促进细胞生长，保护细胞。当前市售血清各种各样，选择合适的血清对于保证细胞生长状态至关重要。血清中蛋白含量是非常重要的指标，其中，球蛋白含量是重要的指标，含量越低，血清质量越高；血红蛋白也是越低越好。虽然血红蛋白含量高低可能不直接影响血清质量，但其体现着采血过程的严谨规范程度，有助于筛选合适的高质量、质量稳定的血清。
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避免各种微生物及支原体污染
在细胞培养过程中，容易影响细胞生长而又很容易忽视的就是支原体的污染。支原体是微小的生物，需要通过 0.1 um 孔径的滤膜去除。支原体、病毒的污染在显微镜下也难以观察，但会影响细胞生长，会严重影响实验结果。高质量的血清/细胞培养基产品多是通过 0.1 um 的滤膜过滤，在细胞培养基准备过程中去除支原体污染。常用的赛默飞 Nalgene 0.1 um 无菌过滤装置，被称为降低细胞培养污染的最后一道防线。
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选择高质量血清/培养基
血清的促生长效果，也就是通过培养细胞来验证，适合所用细胞系生长的血清才是最合适的。
对于血清选择来说，血清的来源是一个首要筛选因素，受饲养环境及生产工艺影响，一般原产澳洲或新西兰的血清品质较好。其次看血清的外观，高质量的胎牛血清呈黄色或红色，蛋白和脂类物质含量低，表现为稀薄、清亮，而新生牛血清相对粘稠，颜色略深。而偶尔会见到的血清沉淀物跟生产工艺相关，除对细胞显微观察会有影响外，基本不影响细胞生长。
在这里有个窍门分享给大家：血清/细胞培养基选择过程中，也可以直接通过产品的外在包装等评估其价值。如老话所说「好马配好鞍」，高品质的血清/细胞培养基等为了保证产品质量稳定，多选择高质量的包装瓶产品，如血清瓶上的「Nalgene」标志。Nalgene 血清瓶，以其美国药典 VI 标准、无细胞毒性、通过严格的防漏认证、高气体阻隔作用闻名业界，是血清/细胞培养基等 pH 敏感样品的理想容器。
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内容策划：邹礼平
内容审核：吴军
题图来源：图虫创意
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