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《动物模型构建与行为学评估》电子版pdf,网盘发货

动物模型构建与行为学评估》V1.0共计约540页, 主要围绕生物医学领域中动物实验的核心方法,详细介绍了如何通过构建动物模型来研究疾病机理,并且使用行为学评估手段验证这些模型的有效性。书中的内容适用于研究人员在进行神经科学、药理学、生物医学等领域的实验时,理解和运用动物模型这一重要工具。

糖尿病(Diabetes mellitus, DM)是一种以高血糖为病理特征的进行性慢性代谢性疾病。

DM动物模型的建立:

1.将49~56天龄的雄性C57BL/6小鼠从学校动物房领回后适应饲养环境3天。禁食(不禁水)至少4h后,测定FBG和体重并记录,同时通过分笼和剪不同脚趾的方式标记每一只小鼠;

2.随机将小鼠分为STZ组和Vehicle组,每组数量相同。STZ组按照150mg/kg的剂量腹腔注射STZ(22.5mg/mL),Vehicle组按照同样计量腹腔注射Vehicle溶液,注射当日计为第0天,即D0。其中STZ组给予10%葡萄糖水(10g葡萄糖加90mL双蒸水)饮用过夜(STZ粉末在避光、-20℃条件下存放,现配现用);

3.鉴定:分别在注射后3d,7d,14d,28d,56d以及84d,将两组小鼠禁食4h后,测定FBG值和体重值。其中,在注射后3d,将STZ组FBG值大于16.7mmol/L的小鼠视为建模成功小鼠,纳入后续实验。待注射后28d(STZ-D28)进行实验。

小鼠视网膜电图(F-ERG)

对Vehicle组和STZ-D28组小鼠进行检测:1.将小鼠置于暗室适应12h后进行称重。在暗红光环境中,通过腹腔注射1%戊巴比妥钠(50mg/kg)对小鼠进行麻醉,待麻醉成功后,放于37℃恒温加热板上,托吡卡胺滴眼液点双眼散瞳,5min后盐酸奥布卡因滴眼液点双眼行表面麻醉;

2.打开电生理记录软件Retiscan,将小鼠自然置于电生理检测平台上,将针状电极插入双眼鼻侧皮下作为参考电极,将铂金角膜环状接触电极固定在双眼角膜表面作为记录电极,将接地电极插入尾部皮下

3.连接完成后,检测调零波形,并记录0.5log(cd·s·m−2;0dB)光强刺激下0.1-300-Hz的F-ERG反应波形,每次刺激间隔至少1min;

4.记录完毕后,将小鼠轻柔置于加热板上复苏,待其麻醉苏醒后送回动物房继续饲养。

小鼠视觉诱发电位(F-VEP)

对Vehicle组和STZ-D28组小鼠进行检测:1.将小鼠置于暗室适应12h后进行称重。在暗红光环境中,通过腹腔注射1%戊巴比妥钠(50mg/kg)对小鼠进行麻醉,待麻醉成功后,放于37℃恒温加热板上,托吡卡胺滴眼液点双眼散瞳,5min后盐酸奥布卡因滴眼液点双眼行表面麻醉;

2.打开电生理记录软件Retiscan,将小鼠置于电生理检测平台上,将针状记录电极插入小鼠颅骨(距兰氏缝2mm处)作为记录电极,另一针状电极插入鼻上方正中央皮下作为参考电极,接地电极插入尾部皮下,选择软件中F-VEP模式进行记录待测眼,同时对侧眼用黑布遮盖,记录完后遮盖待测眼,记录对侧眼;

3.记录完毕后,将小鼠轻柔置于加热板上复苏,待其麻醉苏醒后送回动物房继续饲养。

利用STZ特异性地破坏胰岛β细胞、减少胰岛素释放,从而诱导出血糖水平升高的I型糖尿病小鼠模型。作者利用STZ诱导I型糖尿病小鼠模型,观察造模后0,3,7,14,28,56和84天小鼠的空腹血糖水平(FBG)和体重水平。将接受单次腹腔注射剂量为150mg/kg的STZ的49d~56d区间天龄的成年雄性C57BL/6小鼠定义为STZ组;将接受同等剂量柠檬酸缓冲液腹腔注射的同年龄同性别C57BL/6小鼠定义为Vehicle组。从D3开始,STZ组小鼠出现明显多饮、多尿现象,同时,STZ组小鼠的FBG值较Vehicle组和基线水平显著增加,但体重明显减轻。并且,上述糖尿病特征性变化维持到D84,说明利用STZ可以成功地造出I型糖尿病小鼠模型,其高血糖状态可以维持到注射后84天。

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Fig1 STZ-D28小鼠视神经传导功能和神经视网膜功能均下降

(a)STZ诱导造模和视觉电生理实验时间点示意图;(b)两组小鼠F-VEP实验的代表性波形图和实验结果

文献引用:

1.Myelin Deficits Caused by Olig2 Deficiency Lead to Cognitive Dysfunction and Increase Vulnerability to Social Withdrawal in Adult Mice[J]. Xianjun Chen;Fei Wang;Jingli Gan;Zhonghua Zhang;Xuejun Liang;Tao Li;Nanxin Huang;Xiaofeng Zhao;Feng Mei;Lan Xiao.Neuroscience Bulletin,2020(04)

2.Insufficient oligodendrocyte turnover in optic nerve contributes to age-related axon loss and visual deficits.[J]. Zhi JunJie;Wu ShuangLing;Wu HaoQian;Ran Qi;Gao Xing;Chen JinFei;Gu XingMei;Li Tao;Wang Fei;Xiao Lan;Ye Jian;Mei Feng.The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience,2023

3.Streptozotocin‐Induced Diabetic Models in Mice and Rats[J]. Furman Brian L..Current Protocols,2021

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