非梅毒螺旋体抗原血清试验

非梅毒螺旋体抗原血清试验

梅毒螺旋体抗原血清试验,包括性病研究实验室(VDRL)试验、快速血浆反应素(RPR)环状卡片试验、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等

VDRL试验

VDRL试验

【基来源根基理】

梅毒螺旋体感染人体后,宿主会发生抗类脂抗原的抗体(反应素),与一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物抗原反应,可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体

【仪器资料】

1. 梅毒水平旋转仪、显微镜

2. 试剂盒:VDRL抗原原液、VDRL缓冲液、抗原滴管及针头、带直径14mm漆圈的玻璃反应板、VDRL试验结果参照图片

3. 30mL平底玻璃小瓶、生理盐水

【标本收集】

1.血清:抽取静脉血,室温静止凝固后,分离新鲜血清.也可采纳冻存的血清.

2.脑脊液:采纳腰椎穿刺术获得,应由相关专业人员把持.

【操作步骤】

1.VDRL抗原配制

2.VDRL玻片定性试验

(1)灭活:血清标本56℃灭活30分钟.

(2)吸样:吸取0.05mL血清放入反应板圈中,将血清涂布到整个圈内.

(3)加抗原:用标准针头加入1滴抗原.

(4)反应:将反应板置梅毒水平旋转仪上旋转4分钟,〔(180±2)次/分钟〕,立即置低倍显微镜下观察

(1)加稀释液:在圈加入0.05mL生理盐水(根据需要确定稀释度).

(2)样本稀释:吸取0.05mL样本与各圈中盐水作系列稀释并涂布整个圈内.

(3)以下步伐同定性试验(2)~(4)

【结果判读】

凝集反应强度分级:

3+~4+:年夜的或中等年夜小的絮状物,液体清亮

2+:絮状物较小,液体较清亮

1+:絮状物较小,均匀分布,液体混浊

±:抗原复合物颗粒稍粗

-:抗原颗粒均匀、细小

【结果陈说】

1.定性试验:

(1)阳性:镜下可见1+~4+的絮状凝集物.

(2)阴性:不发生凝集反应.

2.定量试验:

滴度:镜下可见絮状凝集物的血清最高稀释倍数.

【临床意义】

对一期、二期、潜伏期和晚期梅毒患者的敏感性分别为78%、100%、96%和71%.脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义.

【注意事项】

1.VDRL用抗原需当天配制.

2.试验反应完毕,应立即观察结果.

RPR试验

RPR试验

【基来源根基理】

RPR试验是VDRL试验的一种改良方法.该法在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭颗粒,与待检血清(浆)中的反应素结合,形成肉眼可见的黑色絮状物.

【仪器资料】

1.水平旋转仪.

2.RPR试剂盒:RPR抗原、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头.

【标本收集】

1.血清:抽取静脉血,室温静止凝固后,分离新鲜血清.也可采纳冻存的血清.

2.血浆:各种抗凝剂制备的血浆.

【操作步骤】

1.定性试验

(1) 加样:吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中,并均匀地涂布在整个圈内.

(2)加抗原:将抗原轻轻摇匀,用9号针头[每毫升(60±1)滴]加1滴抗原.

(3)反应:将卡片置梅毒水平旋转仪旋转8分钟[(100±2)转/分钟].立即在亮光下观察结果

2.定量试验

(1)稀释液准备:在圈内加入0.05mL生理盐水(根据需要确定稀释度),勿将盐水涂开.

(2)加样:吸取0.05mL血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释,并涂布整个圈内.

(3)同定性试验(2)~(4).

【结果判读】

凝集反应强度分级:

3+~4+:圆圈内呈现中到年夜的黑色絮状物,液体清亮

2+:圆圈内呈现小到中的黑色絮状物,液体较清亮

1+:圆圈内呈现小的黑色絮状物,液体混浊

-:圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或均匀分散

【结果陈说】

1.定性试验:

(1)阳性:呈现1+~4+强度的凝集反应.

(2)阴性:不发生凝集反应.

2.定量试验:

滴度:呈现凝集反应的血清最高稀释倍数.

【临床意义】

1.RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查.

2.对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为86%、100%和98%.

【注意事项】

试验应在23~29℃环境中进行

TRUST试验

TRUST试验

TRUST试验是用甲苯胺红颗粒取代RPR试验中的碳颗粒作为指示物,所以阳性结果为红色絮状物.其基来源根基理、仪器资料、标本收集、把持步伐、结果判读、结果陈说、临床意义及注意事项等与RPR试验基本相同