好书推荐！《动物行为实验指南》电子版pdf，网盘发货

《动物行为实验指南》共674页，涵盖了常见的实验动物，如小鼠、大鼠和斑马鱼，详细描述了每一种行为测试的实验设计、测试设备、实验流程、评估指标、预期结果、常见问题及解决方法、数据分析、模型应用与局限性等各个方面。它通过快速引导，帮助研究人员高效地掌握实验的每个阶段，减少了查阅文献和寻找方法的时间，成为各类科研人员的重要参考资料。 《动物行为实验指南》共计收录了16种动物行为类型，包括焦虑抑郁、学习记忆、痛觉、运动、恐惧、社交、癫痫、操作、成瘾、视觉、痒觉、味觉、嗅觉、睡眠、斑马鱼行为以及常见动物模型等内容。每一类动物行为下，都详细介绍了多个经典的实验范式，涵盖了超过100种实验方法。 www.behaviewer.com

熟练行走对行走适应性至关重要，涉及复杂的感觉-运动功能及多系统协调，其适应性受神经系统影响，中枢神经疾病或损伤会削弱此能力。水平爬梯常被用于评估动物的熟练行走能力，通过足部失误评分评估行走适应性，该评分反映多种行走相关因素，测试装置简单，评分系统只需摄像机和简单培训。水平爬梯测试在评估运动功能和肢体协调性方面是有效且客观的，它也可以评估缺血性和出血性中风模型中的长期中风预后。

Fig1 梯级行走测试装置示意图

横杆可按对称或不对称模式插入，大鼠装置的横杆间距可在1至5厘米间变动，小鼠装置的横杆间距可在0.5至2.5厘米间变动。动物从空箱开始测试，需通过行走抵达家笼。

梯级行走测试

两种LRWT装置，一种用于大鼠，另一种为小鼠特制。两种装置均由透明的有机玻璃侧壁构成（长100厘米，高20厘米）。金属横杆的直径有所不同，大鼠用的横杆直径为3毫米，小鼠用的为2毫米。横杆之间的最小和最大间距也有差异，大鼠装置横杆间距为1-5厘米，小鼠装置为0.5-2.5厘米。两种情况下，梯子均水平架高在离地面30厘米处，起始位置放置一个中性笼子，动物的家笼则放在梯子的另一端。两壁之间的距离根据啮齿动物的体型调整，比动物的身宽多出1厘米，以防止动物在通过过程中转身。

金属横杆的排列模式对熟练行走程度有不同要求，可用于改变测试的复杂程度。规则排列能让动物在训练过程中记住横杆位置，从而预判肢体放置位置。而在不规则模式中，每次试验横杆都会随机重新排列，防止啮齿动物记住横杆顺序。因此，在研究熟练行走时，不规则模式更为有用。

在测试中，将动物放置在梯子起始端，它们沿着梯子行走，在横杆上调整足部位置，直至到达家笼。测试过程中使用一台相机拍摄啮齿动物。采用每秒240帧（FPS）的采集速率从侧面拍摄，以便逐帧分析视频。

梯级行走测试评分系统

为评估前肢和后肢在横杆上的放置情况，这需要精确且协调的足部定位以及步幅和肢体间的协调，一种基于分类分析的定量足部失误评分系统，通过逐帧分析视频记录来识别每个肢体的动作，并使用7分制类别量表对足部放置情况进行评定。

当肢体未接触横杆（错过横杆）并导致摔倒（完全错过）时，得分为0。当肢体落入横杆之间且动物的姿势和平衡受到干扰时，即判定为摔倒。当肢体从横杆上滑落并导致摔倒（严重滑落）时，得分为1。当肢体在承重时从横杆上滑落，但未摔倒且啮齿动物中断行走（轻微滑落）时，得分为2。当啮齿动物在将肢体承重于横杆之前，迅速抬起脚并将其放在另一根横杆上（替换），得分为3。当肢体明显即将放在某根横杆上，但啮齿动物迅速改变足部放置位置到另一根横杆，且未接触第一根横杆时，得分为4。当肢体已放在横杆上，但动物又将脚移开并重新放在同一根横杆上时，也得分为4。当肢体使用前肢的腕部或指部，或后肢的脚跟或脚趾放在横杆上（部分放置）时，得分为5。最后，当整个身体重量通过脚的中部施加在横杆上（正确放置）时，得分为6。

记录总穿越时间、停顿次数、总停顿时间、前肢0-6分各分数段情况、前肢总得分、后肢0-6分各分数段情况、后肢总得分以及四肢总得分。

熟练行走表现分数（SWPS）以占最大可能表现（100%）的百分比来表示。每只啮齿动物穿越梯子所经过的步数周期数（NC）乘以6（足部失误评分系统中每个周期的最高得分），得出的数字即为每只动物在一次试验中的最大可能表现（100%）。然后，在一次试验中，根据足部失误评分系统对每个周期进行评分，所获得分数的总和即为该次试验的总得分（TS）。最后，熟练行走表现分数（SWPS）以占最大可能表现（100%）的百分比来表示。其中，SWPS为熟练行走表现分数，TS为试验总得分，NC为步数周期数，6为足部失误评分系统中每个周期的最高得分。

逐帧分析肢体动作并评分

在分析视频时，要仔细观察每个肢体在横杆上的放置动作，确定其属于哪种评分类别。例如，注意动物是否有滑倒、替换、纠正足部放置位置等动作。

对每个肢体的每个动作进行评分后，将每个类别所给的分数乘以该类别中足部放置的出现频率。例如，如果某一肢体的某个动作得分为3，且这个动作在整个行走过程中出现了5次，那么这一动作对应的总分为3×5=15分。

计算总得分

计算前肢和后肢各自的总得分。前肢和后肢的各个动作类别得分相加后，分别得到前肢总得分和后肢总得分。

四肢总得分是前肢总得分与后肢总得分之和。这个总得分能够综合反映动物在行走过程中的整体运动功能情况。

结合其他指标评估

除了足部失误评分外，还可以结合其他测试结果来更全面地评估动物的运动功能。例如，同时考虑动物在的总穿越时间、停顿次数、总停顿时间等指标。

文献引用：

  • Martins LA, Schiavo A, Xavier LL, Mestriner RG. The Foot Fault Scoring System to Assess Skilled Walking in Rodents: A Reliability Study. Front Behav Neurosci. 2022 Apr 29;16:892010. doi: 10.3389/fnbeh.2022.892010. PMID: 35571280; PMCID: PMC9100421.

  • Modi AD, Parekh A, Patel ZH. Methods for evaluating gait associated dynamic balance and coordination in rodents. Behav Brain Res. 2024 Jan 5;456:114695. doi: 10.1016/j.bbr.2023.114695. Epub 2023 Oct 1. PMID: 37783346.

  • Shelton SB, Pettigrew DB, Hermann AD, Zhou W, Sullivan PM, Crutcher KA, Strauss KI. A simple, efficient tool for assessment of mice after unilateral cortex injury. J Neurosci Methods. 2008 Mar 15;168(2):431-42. doi: 10.1016/j.jneumeth.2007.11.003. Epub 2007 Nov 19. PMID: 18164073; PMCID: PMC2702871.

  • Schaar, K.L., Brenneman, M.M. & Savitz, S.I. Functional assessments in the rodent stroke model. Exp & Trans Stroke Med 2, 13 (2010). https://doi.org/10.1186/2040-7378-2-13.