在科研领域,尤其是高分子材料、生物制药等学科,准确测定物质的分子量及分子量分布至关重要。它不仅能帮助我们了解材料或药物的分子特性,更是把控产品质量、优化工艺、推动科研进展的关键因素。
一
分子量及分子量分布
分子量是指物质分子或特定单元的平均质量,它反映了分子的大小。而分子量分布则描述了聚合物或复杂混合物中不同分子量分子的相对含量分布情况,直观展现了分子大小的均匀程度。例如,窄分子量分布意味着聚合物分子大小较为均一,其性能往往更加稳定、可控;宽分子量分布则表示分子大小差异较大,可能会对材料的力学性能、加工性能等产生复杂影响。
二
常用分子量及分子量分布检测方法
(一)液相色谱(LC)
原理:以液体作为流动相,样品混合物在色谱柱中基于各组分在固定相和流动相之间的分配系数、吸附能力、分子大小等差异实现分离。对于分子量及分子量分布检测,可通过与合适的检测器(如示差折光检测器、蒸发光散射检测器等)联用,依据不同分子量组分的保留时间和峰面积,计算分子量及分布情况。例如,在反相液相色谱中,分子与固定相之间的疏水作用差异会影响其保留行为,从而实现按分子量的分离。
优点:分离效率高,可分离复杂混合物;适用范围广,能分析极性、非极性、热不稳定等多种类型的化合物;与多种检测器兼容,可根据样品特性选择合适的检测方式,获取丰富的信息。
应用场景:在小分子化合物、生物活性物质(如多肽、氨基酸)的分离分析及分子量测定中广泛应用;也可用于部分高分子材料的分子量及分子量分布的初步检测和分析。
(二)凝胶渗透色谱法(GPC)
原理:基于体积排阻原理,样品溶液通过填充有多孔性凝胶材料的色谱柱,不同分子量的分子因在凝胶孔内的渗透程度不同而实现分离。小分子能够进入凝胶的小孔,在柱内停留时间长;大分子则只能在凝胶颗粒间的空隙流动,较早流出,从而按分子量从大到小的顺序依次被洗脱。
优点:操作相对简便,可同时测定分子量及分子量分布;适用于多种类型聚合物,如合成高分子、天然高分子等;能够快速获得分析结果。
应用场景:广泛应用于高分子材料研发、质量控制,如塑料、橡胶、纤维等产品的分子量及分子量分布测定。
三
样本类型及建议样本量
(一)样本类型
高分子聚合物:包括合成高分子(如聚乙烯、聚丙烯)和天然高分子(如纤维素、淀粉),是分子量及分子量分布检测的主要对象之一,广泛应用于材料科学领域。
生物大分子:如蛋白质、核酸、多糖等,在生物制药、生命科学研究中,准确测定其分子量及分布对于药物研发、生物活性研究至关重要。
有机小分子:部分有机小分子混合物,在有机合成、精细化工等领域,了解其分子量分布有助于评估反应产物的纯度和组成。
纳米颗粒:纳米材料的粒径和分子量分布对其性能和应用具有重要影响,因此也是常见的检测样本类型。
液相色谱(LC):根据所使用的色谱柱和检测器的灵敏度,一般进样量在几微升到几十微升之间。对于常规分析,样品可控制在10 - 20 mg,实际样品量需根据样品的性质和检测要求进行调整。
凝胶渗透色谱法(GPC):对于聚合物样品,一般建议样品量在 10 - 20 mg 之间,具体取决于样品的浓度和色谱柱的规格。如果样品浓度较低,可适当增加样品量;若样品浓度较高,则需稀释后再进样,以避免色谱柱过载。
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