果蔬中脂肪含量相对较低,且果蔬组织结构复杂,含有大量水分、膳食纤维、糖类等成分,这些成分可能会干扰脂肪的提取和测定。因此,在测定果蔬中脂肪含量前,需要对样品进行适当的前处理,以去除干扰物质,提高脂肪提取的效率和准确性。以下是常见的样品前处理方法:

一、样品制备

  • 清洗与擦干
    • 目的:去除果蔬表面的泥土、农药残留等杂质,避免这些杂质干扰后续的脂肪提取和测定。
    • 操作:将新鲜果蔬用流动的清水冲洗干净,对于表面有较多绒毛或褶皱的果蔬,可适当增加冲洗时间或用软毛刷轻轻刷洗。冲洗后,用干净的滤纸或纱布轻轻擦干果蔬表面的水分。
  • 切分与匀浆
    • 目的:增大果蔬样品的表面积,使脂肪更容易被提取出来。
    • 操作:将擦干后的果蔬切成小块,去除不可食部分(如果核、果皮等)。对于质地较软的果蔬,如香蕉、草莓等,可直接放入匀浆机中匀浆;对于质地较硬的果蔬,如苹果、胡萝卜等,可先切成薄片或小块,再进行匀浆。匀浆时要控制好时间和速度,避免样品过热导致脂肪氧化或分解。一般匀浆至样品呈均匀的糊状即可。

二、干燥处理(可选)

  • 适用情况:当果蔬样品含水量较高时,为了减少水分对脂肪提取的干扰,提高提取效率,可进行干燥处理。但对于一些热敏性果蔬,干燥处理可能会导致脂肪氧化或分解,此时需谨慎选择干燥方法或考虑不进行干燥处理。
  • 干燥方法
    • 冷冻干燥
      • 原理:在低温低压条件下,使果蔬样品中的水分直接升华,从而去除水分,最大程度地保留样品的营养成分和化学结构。
      • 操作:将匀浆后的果蔬样品平铺在冷冻干燥机的托盘上,厚度不宜过厚,一般不超过 1cm。将托盘放入冷冻干燥机中,按照设备的操作规程进行冷冻干燥。冷冻干燥时间根据样品的量和性质而定,一般需要数小时至数十小时。
    • 真空干燥
      • 原理:在较低的温度和真空环境下,加速果蔬样品中水分的蒸发,减少氧化反应的发生。
      • 操作:将匀浆后的果蔬样品放入真空干燥箱中,设置合适的温度(一般不超过 60℃)和真空度。干燥过程中要定期观察样品的状态,直至样品达到恒重。
    • 自然风干
      • 原理:利用自然环境中的空气流动和温度,使果蔬样品中的水分逐渐蒸发。
      • 操作:将匀浆后的果蔬样品平铺在干净的玻璃板或塑料板上,放置在通风良好、阴凉干燥的地方。自然风干时间较长,一般需要数天至数周,且容易受到环境因素的影响,如温度、湿度等。

三、脱脂处理(针对高脂干扰样品,可选)

  • 适用情况:如果果蔬样品中除了待测脂肪外,还含有其他脂溶性物质(如蜡质、色素等),这些物质可能会干扰脂肪的测定,此时可进行脱脂处理。
  • 脱脂方法
    • 有机溶剂萃取
      • 原理:利用有机溶剂对脂溶性物质的溶解性,将果蔬样品中的脂溶性物质萃取出来。
      • 操作:将干燥后的果蔬样品放入索氏提取器中,加入适量的有机溶剂(如石油醚、乙醚等),进行回流提取。提取时间和次数根据样品的性质和脂溶性物质的含量而定,一般提取 6 - 8 小时,直至提取液无色为止。提取结束后,将样品取出,挥发去除残留的有机溶剂。
    • 超临界流体萃取
      • 原理:利用超临界流体(如二氧化碳)的特殊性质,在超临界状态下对果蔬样品中的脂溶性物质进行萃取。超临界流体具有类似气体的扩散性和类似液体的溶解性,能够高效地萃取脂溶性物质。
      • 操作:将干燥后的果蔬样品放入超临界流体萃取仪的萃取釜中,设置合适的压力、温度和萃取时间。启动萃取仪,使超临界流体在萃取釜中循环流动,萃取样品中的脂溶性物质。萃取结束后,收集萃取物,并将样品取出。

四、样品保存

  • 短期保存:如果前处理后的样品需要尽快进行脂肪含量测定,可将样品放入密封的容器中,置于 4℃冰箱中保存,一般可保存 1 - 2 天。
  • 长期保存:若样品需要长期保存,可将样品放入干燥、密封的容器中,置于 -20℃或 -80℃冰箱中冷冻保存。在保存过程中,要避免样品反复冻融,以免影响脂肪的含量和性质。