品名：FAM-LETD-FMK（荧光底物）
用途：科研
一、基本描述
FAM-LETD-FMK 是一种绿色荧光标记的蛋白酶不可逆抑制剂，用于检测活性 Caspase-8 蛋白酶。其结构由三个功能单元组成：FAM 荧光团（5-Carboxyfluorescein）、LETD 四肽识别序列（Leu-Glu-Thr-Asp）以及 FMK（氟甲基酮）基团。该探针可穿透细胞膜，与活性 Caspase-8 特异结合，并通过 FMK 部分形成不可逆共价键，从而实现细胞内酶活性的实时检测和可视化追踪。
二、化学性质
结构组成：FAM–LETD–FMK
激发/发射波长：488 / 520 nm（与FITC相似）
抑制机制：FMK 与半胱天冬酶（Caspase-8）催化中心的半胱氨酸残基形成稳定共价键；
特异性：LETD 序列为 Caspase-8 特异性识别肽，不与Caspase-3或Caspase-9交叉反应；
细胞通透性：良好，适用于活细胞直接染色；
稳定性：冻干粉稳定，避免频繁冻融，避光保存。

三、应用领域
FAM-LETD-FMK 是研究细胞凋亡机制中 Caspase-8 活性检测的经典工具，应用包括：
细胞凋亡检测：通过流式细胞术或荧光显微镜检测活性Caspase-8阳性细胞；
信号通路研究：研究FasL、TNF-α等信号是否激活外源性凋亡通路；
时间分辨成像：实时监控细胞凋亡进程的动态变化；
高通量筛选平台：可适配微孔板进行高灵敏定量检测。
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