产品名称:Cy5标记Streptavidin的优势与局限性
一、优势与局限性
优势
超灵敏检测:通过链霉亲和素-生物素的亲和放大,信号强度显著提升,可检测低至飞摩尔(fmol)级别的目标分子。
低背景干扰:近红外荧光避开生物自发荧光,结合链霉亲和素的高特异性,实现“零背景”或“低背景”检测。
多场景适用:兼容固定样本(如膜、切片)与活体样本,适用于从细胞到活体的多尺度研究。
局限性
成本较高:链霉亲和素与Cy5均为高纯度试剂,标记过程需严格质量控制,导致成本高于传统显色法。
非特异吸附:在极端条件(如高盐、低pH)下,链霉亲和素可能非特异吸附至塑料或玻璃表面,需通过封闭剂(如BSA、脱脂奶粉)预处理。
二、使用注意事项
标记效率验证:需通过SDS-PAGE或紫外-可见分光光度法验证Cy5与链霉亲和素的结合效率(通常要求标记度≥2 mol Cy5/mol Streptavidin)。
反应条件优化:生物素-链霉亲和素结合需在温和条件(如pH 7.0-8.5、室温)下进行,避免高温或极端pH导致蛋白变性。
信号淬灭避免:成像时需避免强光直射(如共聚焦显微镜需用低功率激光预热),且成像后样本可短期保存(4℃避光),但长期保存需冷冻(-20℃)。
注意:用途仅用于科研,以上来自小编wyh,我们可以提供产品的定制服务

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