产品名称:OVA-PEG-DBCO,二苯并环辛炔-聚乙二醇-卵清蛋白的核心合成路线
合成方法
1. 核心合成路线
路线一:分步偶联法
PEG与DBCO的连接:
反应:羧基化PEG(PEG-COOH)与DBCO-NH₂通过EDC/NHS活化缩合,生成PEG-DBCO。
条件:PBS缓冲液(pH 7.4),室温搅拌6-12小时。
纯化:透析或超滤去除未反应试剂。
OVA与PEG-DBCO的偶联:
反应:OVA表面的赖氨酸氨基与PEG-DBCO末端的活性酯(如NHS酯)反应,形成酰胺键。
条件:PBS缓冲液(pH 8.0),4℃过夜反应。
纯化:凝胶过滤色谱(GFC)分离目标产物。
路线二:点击化学预组装法
OVA的叠氮化修饰:
反应:OVA的羧基通过EDC/NHS活化后,与叠氮化乙胺(Azidoethylamine)反应,引入叠氮基团(-N₃)。
PEG-DBCO与叠氮化OVA的点击反应:
反应:PEG-DBCO的DBCO基团与OVA-N₃在生理条件下自发反应,形成三唑键。
条件:PBS缓冲液(pH 7.4),37℃孵育2-4小时。
纯化:超滤离心(10 kDa MWCO)去除小分子杂质。
2. 关键优化参数
投料比:
PEG-DBCO与OVA的摩尔比通常为5:1至20:1,以控制修饰度(通常1-5个PEG链/OVA)。
反应pH:
氨基反应(pH 8.0-9.0)优化酰胺键形成效率。
点击反应(pH 7.4)保持生物分子活性
纯化策略:
凝胶过滤色谱(Superdex 200)分离不同修饰度的产物。
透析(MWCO 10 kDa)去除未结合的PEG-DBCO。
注意:用途仅用于科研,以上来自西安齐岳生物小编wyh,我们可以提供产品的定制服务

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