2025年5月，中山大学肿瘤防治中心康铁邦、武远众团队在 Science杂志发表题为ASB7 is a Negative Regulator of H3K9me3 Homeostasis 的文章。该研究通过全基因组CRISPR筛选，发现ASB7 E3泛素连接酶是抑制异染色质标记H3K9me3的关键因子。
机制如下：ASB7在HP1招募下进入异染色质，促使甲基转移酶SUV39H1被泛素化降解，从而限制H3K9me3过度积累。在有丝分裂期，CDK1磷酸化ASB7，暂时阻断其与SUV39H1的相互作用，使SUV39H1稳定并恢复H3K9me3水平。这一HP1–SUV39H1–ASB7动态回路维持表观遗传稳态，并影响基因组稳定性及肿瘤对PARP抑制剂的敏感性。
鉴于文章对部分读者可能较为晦涩，以下先对关键概念进行解释。
重点名词解释：
异染色质：异染色质具有紧密、致密的结构，染色时通常呈现较深颜色。主要分布在细胞核外围或染色体的特定区域，如着丝粒和端粒。其紧密结构限制了转录因子和转录机械的接触，使相关基因通常处于沉默状态，减少基因转录活性。异染色质的功能涉及基因沉默、基因组稳定性和染色体结构维护。
组蛋白修饰：指发生在组蛋白上的化学变化，包括在组蛋白尾部的特定氨基酸残基上添加乙酰基、甲基、磷酸基、泛素等化学基团。这些修饰不改变DNA核苷酸序列，但可调节DNA对转录机制的可及性。
泛素化：指泛素分子在特定酶作用下，对细胞内蛋白质进行分类、选择靶蛋白并对其进行特异性修饰的过程，是蛋白质组中最普遍的翻译后修饰之一。
磷酸化：蛋白翻译后修饰中最为广泛的共价修饰形式，对蛋白质功能发挥重要调节作用。该过程由蛋白质激酶催化，将ATP或GTP的γ位磷酸基转移至底物蛋白质的氨基酸残基，逆向过程则由蛋白质磷酸酶去除磷酸基团。
蛋白修饰是异染色质形成的关键因素，其中H3K9me3修饰尤为关键。DNA复制后，新加入的未修饰组蛋白会稀释原有标记，HP1蛋白通过识别预先存在的H3K9me3修饰，作为平台招募H3K9me3修饰酶SUV39H1，对相邻新加入的组蛋白进行修饰，形成正反馈循环。
主要结论：
图一展示了作者如何发现并验证CUL5–ASB7能限制H3K9me3水平。首先，通过全基因组CRISPR筛选识别出ASB7（A、B），并示意其作为CUL5 E3连接酶的组成部分（C）。CUT&RUN结果显示，敲除ASB7后，H3K9me3在基因组上显著增强、扩展及新增区域（D–F）；这些新增位点多分布在重复序列和特定基因组区（G）。免疫印迹与免疫荧光实验证明，两条独立sgRNA能敲低ASB7并导致H3K9me3上升（H–J）。总之，ASB7通过调控组蛋白甲基化的写入器，起到“刹车”作用，防止异染色质过度积累。
图二说明了ASB7被HP1带到异染色质的证据与机制。细胞分馏与荧光成像显示ASB7富集于染色质并与H3K9me3共定位；TurboID质谱检出HP1和多种H3K9甲基转移酶与ASB7相互作用，提示异染色质关联。敲低HP1或在ASB7中破坏PxVxL位点会削弱其染色质定位；CUT&RUN测序显示ASB7与HP1在基因组上共占位，支持HP1通过CSD–PxVxL界面招募ASB7到异染色质的模型。
图三展示了ASB7如何通过泛素-蛋白酶体途径调控SUV39H1，进而限制异染色质标记H3K9me3的关键证据。定量蛋白组学显示，过表达ASB7会明显降低SUV39H1的量；反之，敲除ASB7会提高SUV39H1蛋白（A、B）。数据库关联分析显示两者在功能上呈强烈负相关（C）。细胞免疫染色与荧光强度线图表明ASB7与SUV39H1在核内重叠定位（D），CUT&RUN和基因组浏览图则显示两者共占染色质位点，且ASB7缺失会增加染色质结合的SUV39H1和H3K9me3信号（E–G）。阻断蛋白合成的CHX试验证明，ASB7敲除延长了SUV39H1的半衰期（H、I）。进一步实验表明，ASB7缺失会降低SUV39H1的泛素化水平（J），而体外泛素化实验直接证明CUL5–ASB7能够将泛素连接到SUV39H1上，促进其降解（K）。最后，在敲入失活突变的小鼠肺组织中，Suv39h1与H3K9me3水平升高，支持了体内功能相关性（L）。总体结论：CUL5–ASB7作为负调控器，通过靶向SUV39H1的泛素化降解来防止H3K9me3过度积累，维持表观遗传稳态。
总结：本文通过全基因组CRISPR筛选发现，CUL5–ASB7 E3连接酶在HP1引导下进入异染色质，促进甲基转移酶SUV39H1泛素化降解，从而限制H3K9me3积累；在有丝分裂期，CDK1磷酸化ASB7使SUV39H1暂时稳定以恢复H3K9me3。文章优点在于实验证据丰富，涵盖基因筛选、蛋白组学、CUT&RUN到体内小鼠与功能性细胞实验，机制阐述清晰且结合了治疗潜力（ASB7上调可提高PARP抑制剂敏感性）。不足在于多依赖细胞系和特定的小鼠模型，人体肿瘤相关性的直接证据有限；ASB7上游调控、在不同组织或病理状态下的普遍性以及更广泛的转录后果还需进一步验证。
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