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在重组蛋白表达的世界里,我们常常遭遇一个令人头疼的“拦路虎”——包涵体。尤其当目标蛋白来自真核生物或含有疏水结构域时,在大肠杆菌这类原核表达系统中,它们极易“迷失方向”,错误折叠聚集成不溶性的“包涵体颗粒。这不仅让珍贵的蛋白失去活性,更让后续的研究与应用举步维艰。

破局关键:促溶标签的“溶解魔法”

如何让这些“倔强”的蛋白乖乖溶解、正确折叠?答案就在这一类神奇的“溶解助手”——促溶标签。它们是一段具有超高水溶性的多肽或蛋白质序列,通过与目标蛋白融合表达,如同为其穿上了一件“亲水外衣”,显著提升目标蛋白的溶解性,有效减少聚集。

双重守护,价值非凡:

  • 溶解与折叠引导者:促溶标签的核心使命是带动目标蛋白溶解,并在一定程度上辅助其进行正确的三维折叠。

  • 蛋白盾牌:融合标签还能像盾牌一样保护目标蛋白,使其在细胞内或提取后更能抵抗蛋白酶的“攻击”,大大延长半衰期,为后续实验赢得宝贵时间。

明星标签登场:麦芽糖结合蛋白(MBP)

在众多促溶标签中,麦芽糖结合蛋白(MBP) 以其卓越的性能脱颖而出,成为科研与生产中的宠儿。

出身名门:源自大肠杆菌的malE基因,参与麦芽糖转运。

实力担当:分子量约43 kDa (Uniprot ID: P0AEX9)。

核心优势:

  • “促溶王者”: MBP的促溶效果普遍优于另一种常用标签GST。它能显著提升目的蛋白的表达量,并强力驱动其保持溶解状态。对于极易形成包涵体的“顽固”蛋白,MBP往往是拯救表达的“关键先生”。

  • “折叠助手”: 研究表明,MBP不仅能促溶,还能像“分子伴侣”一样,为依附其上的目标蛋白提供更有利的折叠微环境。

  • 温和纯化,活性保障: 最大的亮点在于其温和的洗脱方式——使用麦芽糖溶液。这种接近生理条件的洗脱过程,能最大程度地保护融合蛋白的天然结构和生物活性,避免了强酸、强碱或高浓度咪唑等苛刻条件可能带来的损伤。

实例见证MBP力量:

知名生物试剂供应商Biorbyt提供的重组人Caspase-3蛋白(货号:orb1516789),正是采用了His & MBP双标签策略。

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MBP标签在此成功助力了Caspase-3这一重要凋亡蛋白酶在原核系统中的可溶性表达,为相关功能研究提供了高质量的蛋白原料。

产品链接: https://www.biorbyt.com/recombinant-human-caspase-3-pr-orb1516789.html

如何便捷利用MBP标签?——专业试剂盒助力

想要轻松获得带有MBP标签的高纯度重组蛋白?Biorbyt提供的MBP-Tag Protein Purification Kit (Dextrin)(货号:orb1173392)是您的理想选择。

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Biorbyt这款“MBP-标签蛋白纯化试剂盒”能效纯化高水平的过表达 MBP 标记融合蛋白。该树脂由 90 μm 交联的 6% 琼脂糖珠组成,糊精已与该珠子偶联。测试证实,性能等于或超过其他常用糊精树脂,并且在至少重复使用五次后,性能不会下降。此外,其高流动性使其非常适合放大。

产品链接:https://www.biorbyt.com/mbp-tag-protein-purification-k-orb1173392.html

总结:

面对重组蛋白表达中的溶解性挑战,促溶标签,特别是MBP标签,提供了强大的解决方案。它不仅是提升蛋白溶解性和表达量的“强效引擎”,更是辅助正确折叠、实现温和纯化以保护蛋白活性的“全能护卫”。无论是基础研究还是应用开发,合理利用MBP等促溶标签技术,都将为您打开重组蛋白成功表达与应用的大门。

(温馨提示: 在进行融合蛋白设计时,需根据目标蛋白特性、下游应用需求(如是否需要去除标签)等因素综合考量,选择最合适的促溶标签和纯化策略。Biorbyt的MBP纯化试剂盒为利用该标签的研究者提供了极大的便利。)

关于 MBP蛋白促溶标签,或其他 蛋白促溶标签,你有什么问题或想法?欢迎在留言区和我们互动!

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