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产品名称:CF405L 酪胺偶联物结合TSA技术实现信号放大,CF405L Tyramide Conjugates

应用场景

免疫组化/免疫细胞化学:组织切片或细胞样本中低丰度蛋白的原位检测(如肿瘤标志物HER2、CD20),结合TSA技术实现信号放大。

荧光显微镜:共聚焦/超分辨率成像,观察细胞结构(如细胞膜、细胞器)或动态过程(如细胞迁移、信号通路激活)。

流式细胞术:多参数分析细胞表面标志物、胞内蛋白,活细胞动态追踪(如线粒体、核酸标记)。

分子互作研究:荧光原位杂交(FISH)、蛋白质-蛋白质相互作用(如Pull-down实验)、生物传感器构建。

实验操作要点

样本准备与预处理:4%多聚甲醛固定(室温15分钟),0.1%-0.5% Triton X-100透化(10分钟),BSA/脱脂牛奶封闭非特异性位点(室温1小时)。

TSA反应条件:HRP标记抗体孵育后,加入CF405L Tyramide工作液(含0.0015%-0.003% H₂O₂),室温反应5-10分钟;严格控制反应时间,避免过度沉积导致背景升高。

对照设置:阴性对照(省略HRP或底物)、阳性对照(已知高表达靶标样本)、竞争性抑制实验(添加酪氨酸验证特异性)。

多色成像优化:调整荧光通道设置,避免信号串扰;结合DAPI复染定位细胞核。

注意事项与局限

安全性:仅限科研使用,操作需遵循生物安全规范,佩戴手套、护目镜,避免直接接触皮肤/眼睛。

实验优化:浓度、反应时间需根据样本类型(细胞/组织)调整;高浓度可能导致非特异性结合或光毒性。

局限:活体成像受组织穿透深度限制;多色实验需严格验证光谱兼容性;生物素化标记可能影响抗原结合。

存储与处理:避免反复冻融,取用后充入惰性气体密封保存;荧光标记物需避光操作防止淬灭。

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