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产品名称:Alexa Fluor 660链霉亲和素偶联物的高灵敏度与特异性
1. 技术优势
高灵敏度与特异性:链霉亲和素-生物素系统亲和力较高,结合荧光信号放大,可检测低至皮摩尔级靶标。
低背景干扰:近红外波长减少自发荧光,链霉亲和素无糖基化降低非特异性结合。
实验灵活性:耐受广泛pH、温度及去污剂,适合活细胞实验、固定样本及复杂生物体系。
长波长成像优势:700 nm附近发射波长穿透组织深度大,适用于深层组织切片及活体成像。
生物相容性:无免疫原性,适合体内实验及临床前研究。
2. 实验优化与注意事项
反应条件:在弱碱性缓冲液(pH 7.0-8.5)中进行偶联,避免强酸/碱或巯基试剂干扰。反应时间1-4小时,室温或4℃孵育。
纯化与储存:通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应染料;-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;工作液现配现用。
对照设置:设置未标记链霉亲和素对照、游离AF660对照,排除非特异性结合。
内源性生物素干扰:在富含生物素的组织(如肝脏、肾脏)中,需使用内源性生物素封闭试剂盒降低背景。
仪器兼容性:确保显微镜/流式细胞仪滤光片匹配AF660光谱(如663 nm激发/690 nm发射),选择远红外通道(如Cy5/AF750通道)。
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