发酵染菌：指青霉素发酵体系中侵入产酸菌、产气杆菌等杂菌，导致纯种培养失效的现象，此类杂菌多能分泌青霉素酶破坏产物。
染菌的途径
种子罐灭菌死角：菌丝体附着罐壁形成生物膜，常规灭菌不彻底
培养基连续灭菌冷却段：板式换热器泄漏引入杂菌
空气过滤器破损：高效过滤器（HEPA）完整性失效致空气污染
补料操作污染：补加前体物质时无菌操作不规范
染菌发生的不同时间对发酵的影响
种子培养期染菌：菌体浓度低，杂菌快速占据优势，带入发酵罐将导致全罐报废，需立即弃种并灼烧种子罐内壁。
发酵前期染菌：未产青霉素或产量极低，杂菌分泌青霉素酶快速降解潜在产物，通常需重新灭菌接种。
发酵中期染菌：pH 骤降（至 5.0 以下），糖耗加速 30% 以上，菌丝自溶发粘，已产青霉素降解率达 80%，基本无挽救价值。
发酵后期染菌：虽产物积累较多，但青霉素酶持续作用仍会导致效价下降，需立即放罐提取。
发酵罐染菌的判断
状态参数的异常变化
pH 值：染产气杆菌后 4 小时内下降 0.8-1.2 个单位
PO₂值：杂菌耗氧激增，1 小时内下降 40% 以上
泡沫：菌丝自溶引发暴发性泡沫，消泡剂无效
青霉素酶活性：酶活检测值超过 0.5 U/mL 可确诊
发酵罐染菌途径的大致判断
细短产气杆菌：补料系统灭菌不彻底
芽孢杆菌：蒸汽压力不足导致灭菌失败
假单孢杆菌：冷却系统泄漏
噬菌体：环境气溶胶传播
发酵罐染菌常规处理办法
立即放罐，采用 1.2% NaOH 溶液循环清洗罐体 2 小时
更换三级空气过滤器，进行气溶胶完整性测试
核查灭菌记录：确保 121℃、30 分钟的灭菌参数达标
对种子罐、补料罐进行联合无菌培养验证
车间用甲醛熏蒸 12 小时，空间菌落数控制在 10 CFU/m³ 以下
补料操作执行 “双人核对 + 全程无菌取样监控” 流程
新型常温灭菌方案：青霉素发酵专用消毒技术
润联生命科学针对青霉素对高温敏感的特性，推出欧菲姆 LIU 智能灭菌系统，核心优势包括：
纳米级干雾渗透：粒径＜10μm 的消毒剂雾滴可覆盖发酵罐搅拌桨、挡板等死角，杀菌率 99.999%
常温灭菌保护产物：25℃条件下杀灭青霉素酶产生菌，避免高温导致的前体物质分解
人机共存安全操作：消毒时无需停产撤离，单罐处理时间缩短至 2 小时
数据追溯可视化：自动记录灭菌参数，符合 GMP 验证要求
生物发酵企业青霉素车间染菌、噬菌体污染难题，可联系润联李工获取定制方案，技术团队提供从设备验证到现场消杀的全流程支持。
热门跟贴