发酵染菌：指培养基配制、灭菌过程中杂菌未彻底杀灭，导致发酵体系初始污染的现象，固体原料灭菌死角是主要诱因。

染菌的途径

  • 原料预处理不足：固体原料结块，灭菌蒸汽无法穿透

  • 灭菌参数不足：温度未达 121℃或保温时间＜30 分钟

  • 冷却过程污染：灭菌后培养基冷却至 37℃以下时引入杂菌

  • 配料罐污染：配制培养基的罐体未彻底灭菌

染菌发生的不同时间对发酵的影响

  • 种子培养期染菌：培养基初始带菌导致种子无法生长，需重新配制灭菌

  • 发酵前期染菌：杂菌基数高，24 小时内占据发酵体系，生产菌无法定植

  • 发酵中期染菌：培养基中杂菌芽孢萌发，导致二次污染，产物合成停止

  • 发酵后期染菌：虽影响较小，但杂菌代谢产物增加提取难度

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发酵罐染菌的判断

状态参数的异常变化

  • 发酵初始异常：接种后 6 小时内 pH、PO₂即出现波动

  • 杂菌浓度高：初始杂菌浓度＞10³ CFU/mL

  • 灭菌记录异常：灭菌温度曲线存在平台期不足

  • 培养基检测：灭菌后培养基留样培养出现菌落

发酵罐染菌途径的大致判断

  • 芽孢杆菌：灭菌温度不足或时间不够

  • 大肠杆菌：冷却过程无菌操作不规范

  • 霉菌：配料罐灭菌不彻底

  • 混合杂菌：原料预处理失败

发酵罐染菌常规处理办法

  • 废弃污染培养基，对发酵罐进行 121℃灭菌 45 分钟

  • 原料采用粉碎后灭菌，确保蒸汽穿透性

  • 培养基冷却系统加装无菌空气保护，维持正压

  • 配料罐采用 “空罐灭菌 + 实罐灭菌” 双重处理

  • 核查灭菌器温度传感器准确性，校准设备

  • 建立 “培养基灭菌后每批次留样” 制度

新型常温灭菌方案：培养基高效灭菌技术

润联生命科学针对培养基灭菌痛点，推出常温灭菌方案：

  • 原料预灭菌：诺福抑菌液喷洒原料，杀灭表面杂菌及芽孢

  • 常温灭菌：培养基配制后无需高温，添加食品级灭菌剂即可灭菌

  • 即时使用：灭菌后可直接接种，无需冷却，缩短生产周期

  • 营养保护：避免高温导致的维生素、氨基酸等营养成分破坏

发酵企业遇培养基灭菌反复失败、原料浪费严重等问题，可联系润联李工，提供培养基配制到灭菌的优化方案。

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