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产品名称:CAS:400051-84-5,Cyanine5-Sulfo-NHS的光谱特性与优势
1. 结构特性与化学设计
核心结构:由Cy5荧光团(含两个吲哚环通过聚甲烯链共轭连接)、磺酸基(-SO₃⁻)及N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)三部分组成。分子式为C₃₉H₄₇N₃O₇S,分子量701.88。
功能设计:
磺酸基:增强水溶性,减少有机溶剂依赖,降低非特异性吸附,提升信噪比;负电荷特性优化生物相容性。
NHS酯:在弱碱性条件(pH 7.0-8.5)下与生物分子(如蛋白质、抗体、核酸的伯氨基)发生亲核取代反应,形成稳定酰胺键,实现共价标记。
Cy5荧光团:近红外发射(激发/发射波长约646-649 nm/665-685 nm),穿透力强,背景干扰低。
2. 光谱特性与优势
近红外优势:发射波长位于近红外区(670 nm左右),可穿透深层组织(厘米级),适用于活体成像、肿瘤靶向及药代动力学研究。
高灵敏度:高消光系数(>200,000 M⁻¹cm⁻¹)与荧光量子产率,确保强荧光信号;与FITC/Cy3等染料光谱不重叠,支持多色标记与共定位分析。
稳定性:光稳定性良好,但需避光保存;水溶性设计避免有机溶剂毒性,适合生理环境应用。
3. 核心应用场景
生物分子标记:标记抗体、酶(如BSA、IgG)、核酸(氨基修饰DNA/RNA)及肽段,用于Western Blot、免疫荧光、流式细胞术、ELISA等。
活细胞与体内成像:标记细胞表面蛋白(如CD分子)、内吞分子或纳米颗粒,追踪细胞迁移、分泌及内吞过程;适用于肿瘤靶向成像、脑部疾病研究(如阿尔茨海默病)。
多重检测与共定位:结合其他荧光染料(如Cy3、FITC)实现多通道成像,分析分子共定位及信号通路。
纳米材料功能化:修饰氨基化纳米颗粒(如SiO₂、金纳米颗粒)或脂质体,用于智能药物递送、生物传感器构建。
4. 合成与使用规范
合成路径:通常通过Cy5染料与NHS在DMSO/PBS体系中反应,经柱层析或凝胶过滤纯化,产率≥90%。
储存条件:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;反应需在弱碱性缓冲液(如碳酸盐缓冲液、PBS)中进行,防止水解。
标记优化:根据目标分子氨基含量调整试剂比例,避免过度标记影响功能;标记后需通过透析或凝胶过滤去除游离染料,纯度≥95%。
安全规范:仅供科研使用,不可用于人体;操作需避光、低温,佩戴防护设备,避免皮肤/黏膜接触。
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