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产品名称:Alexa Fluor 350 Hydrazide的优势与对比
1. 生物医学应用场景
细胞标记与成像:
活细胞追踪:通过显微注射、膜片钳电极灌流或细胞摄取诱导剂进入细胞,实现细胞器(如高尔基体)、代谢物(如丙酮酸、酮体)的实时成像。
糖蛋白/聚糖标记:特异性标记细胞表面糖蛋白或多糖(如肿瘤细胞糖基化修饰),追踪其从内质网到细胞膜的运输路径,适用于肿瘤研究。
多色标记:与DAPI等染料兼容,利用大斯托克斯位移减少信号串扰,适配流式细胞术、共聚焦显微镜及超分辨成像(如STED/STORM)。
代谢通路研究:
标记含羰基的代谢物(如糖酵解中间产物、酮体),动态监测代谢途径(如糖尿病模型中肝脏组织丙酮酸含量变化,高脂饮食组酮体生成速率提升2.3倍)。
分子检测与传感器:
结合链霉亲和素-生物素系统,构建高灵敏度生物传感器(如ELISA、微流控芯片),检测整合素表达、肿瘤标志物或药物代谢产物。
用于RNA/DNA末端标记,通过与氧化后的3'端醛基反应,实现寡核苷酸荧光标记。
2. 优势与对比
性能优势:
光稳定性显著优于荧光素类染料,荧光强度高,背景干扰低。
与DAPI光谱相似但斯托克斯位移更大,可直接用DAPI滤片组成像,兼容性佳。
低分子量(350 Da)使其膜不可渗透,需通过主动摄取或注射进入细胞,减少非特异性标记。
对比其他染料:
相比Alexa Fluor 488/594等,350 nm激发/445 nm发射更适合紫外/蓝色通道,避免近红外染料的串扰。
与Cy系列染料相比,水溶性更优,且无需铜催化反应,降低毒性。
3. 合成与使用注意事项
合成路径:通过磺酸化修饰增强水溶性,酰肼基团经EDC/NHS活化后与生物分子(如蛋白质、核酸)共价偶联,或通过点击化学(如CuAAC)引入。
反应优化:腙键可经氰基硼氢化钠还原为稳定结构,避免逆反应;需控制pH(如中性条件)和温度以确保标记效率。
安全与储存:需严格避光、干燥保存,操作时佩戴防护装备;涉及有毒试剂(如氰基硼氢化钠)时需采取安全措施。
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