Adv Sci丨密码子重编程构建新型流感减毒疫苗：陈凌团队、杨子峰团队合作发表最新成果|世界艾滋病日|密码子|广谱|杨子峰|流感|疫苗|病毒|编程|陈凌

季节性流感每年可导致约 10 亿例感染，仍然是全球公共卫生领域的长期挑战。传统灭活疫苗保护率有限（ 19–60% ）。

近日，广州医科大学呼吸疾病全国重点实验室陈凌教授团队和杨子峰教授团队合作在国际顶级综合类期刊Advanced Science发表题为：Genome-Wide Codon Reprogramming Enables a Multifactorially Attenuated Influenza Vaccine with Broad Cross-Protection的最新研究成果。研究通过全基因组密码子重编程（ genome-wide codon reprogramming ），构建出一株具有1956个沉默突变的新型流感减毒病毒，展现出极高的安全性与广谱保护能力，为下一代广谱流感疫苗设计提供了可行策略。

研究团队对流感病毒多个关键基因节段（ PB2 、 HA 、 NP 、 NA 、 NS ）进行大规模密码子重编程，引入近 2000 个沉默突变，并显著提升 CpG 含量，同时保持蛋白质序列和包装信号完整。最终成功构建出突变负载最高的重编程流感病毒。重编程后的病毒在 MDCK 、 A549 细胞及鸡胚中的复制水平明显下降，空斑显著缩小，滴度降低约 2–3 log 。在小鼠感染实验中，该病毒的半数致死量（ LD ₅₀ ）较野生型降低约 2 万倍，在 10²–10³ PFU 剂量下未观察到显著体重变化或肺部病变。整体表现出良好的安全性，具有进一步开发成疫苗的潜力。

重编程病毒单次免疫小鼠后，可对致死剂量同源 PR8 病毒攻击提供完全保护。与此同时，还可对异源 H1N1pdm09 及异亚型 H3N2 病毒提供交叉保护，体重下降幅度较轻，肺部病毒载量显著降低，肺组织损伤明显减轻，显示出良好的广谱保护潜力。进一步的机制研究表明，重编程病毒的弱毒表型来自多方面的共同作用：其一， NA 段仅保留最小包装信号，导致 NA vRNA 装配效率降低 11.5 倍，大量产生非感染性颗粒；其二，感染细胞中几乎检测不到 NS1 蛋白，病毒难以抑制宿主的先天免疫反应；其三，大幅升高的 CpG 含量使病毒更容易受到 ZAP 蛋白的限制。在以上多重致弱机制叠加下，重编程病毒复制能力明显受限；但其抗原表达仍维持在能够激发黏膜免疫和 T 细胞反应的水平，实现了弱毒性与免疫原性的良好平衡。

全基因组密码子重编程同时引发 NA 包装受限、 NS1 表达缺失与 CpG 上升等多重弱毒机制，成功构建了高度安全且抗原性完整的减毒流感病毒，该病毒在动物模型中可诱导有效的同源与异源免疫保护。此密码子重编程策略能够便捷地拓展至流感流行株，展现出其作为新一代广谱流感减毒活疫苗平台的开发潜力。