面对种类繁多的细胞增殖检测方法,如何根据实验目的做出最佳选择?本文将对几种主流技术进行系统性梳理,助您快速掌握其原理、优劣与适用场景,做到心中有数,实验不惑。

一、代谢活性检测法:反映细胞群体活力此类方法通过检测活细胞代谢酶的活性来间接反映细胞数量和活力。

  1. MTT法:原理是活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶等能将黄色的MTT还原为不溶于水的蓝紫色甲瓒结晶,结晶量可间接反映活细胞数。优点是经典、成本较低;缺点是需溶解步骤,且甲瓒结晶可能因聚集而影响均一性。
  2. CCK-8法:可视为MTT的升级版。其有效成分WST-8在电子耦合剂存在下,被细胞脱氢酶还原生成水溶性的橙色甲瓒产物。最大优势是操作简便,无需溶解,可直接测定,灵敏度更高,线性范围更宽,现已成为主流选择。

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二、DNA合成检测法:直接反映增殖事件此类方法通过检测DNA合成期(S期)的活性,直接标记增殖细胞。

  • EdU/BrdU检测法:EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)或BrdU是胸腺嘧啶类似物,可在DNA复制时掺入新合成的DNA链。随后通过高效的“点击化学反应”(EdU)或免疫染色(BrdU)进行荧光标记,便可在显微镜或流式细胞仪下直接观察或计数S期细胞。这种方法特异性高,能精准定位增殖细胞。

三、直接计数与连续监测法

  • 直接计数法:使用计数板或自动细胞计数仪对细胞进行绝对计数并绘制生长曲线,是最直接的方法,但耗时耗力,不适合高通量。

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  • 实时细胞分析技术:通过整合式微电极板连续监测细胞阻抗,实时绘制细胞指数曲线,可无标记、动态监测增殖、形态变化等,但设备昂贵。

四、如何选择与品质保障选择时需权衡:需要高通量药筛还是单细胞成像?关注整体活力还是特定增殖时相?无论选择哪种方法,试剂的稳定性和可靠性都是数据可信的基石。

亚科因生物(ABBKINE) 提供的解决方案为例,其SuperKine™ 超敏型CCK-8试剂具有卓越的灵敏度和稳定性;其细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法) 则提供了优异的荧光信噪比。

作为一家专注于细胞分析检测试剂自主研发与生产的企业,ABBKINE通过严格的生产质控,保障产品的高批间一致性,确保无论是基础研究还是高通量筛选,都能获得稳定可靠的结果,助力科研探索。

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