近日,河南农业大学周琳教授团队在《Pest Management Science》期刊上发表题为“Heterozygous mutation in the SdhD subunit confers resistance to thifluzamide in the multinucleate pathogen Sclerotium rolfsii”的研究成果。河南农业大学植物保护学院2024级博士研究生蒋超凡和周琳教授为共同第一作者,崔凯娣副教授和何磊鸣副教授为论文共同通讯作者。

该研究团队通过室内药剂驯化,获得了稳定的噻呋酰胺抗性突变体。多代培养结果表明,抗性突变体可维持较高的抗性水平,且在菌丝生长、菌核形成及致病力方面与亲本菌株总体相当,表明其在田间具备较强的生存与竞争能力。通过DAPI荧光染色比较菌丝细胞核数量,发现抗性突变体与亲本菌株在单位菌丝段细胞核数量上无显著差异,说明白绢病菌对噻呋酰胺的抗性发展与细胞核数量变化无关。在分子机制方面,团队对琥珀酸脱氢酶(SDH)四个亚基的编码基因进行了系统测序,发现在所有抗性突变体内均存在SdhD亚基第103位氨基酸由组氨酸(H)变为酪氨酸(Y)的杂合突变(SdhD-H103Y)。分子对接模拟显示,该突变可显著影响噻呋酰胺与SDH复合体的结合构象,降低药剂与靶标蛋白之间的亲和力。进一步通过原生质体遗传转化实验,将携带SdhD-H103Y突变的基因导入敏感菌株,可显著降低其对噻呋酰胺的敏感性,从而在功能上验证了该突变在抗性形成中的决定性作用。此外,焦磷酸测序分析表明,突变等位基因的核型频率与抗性水平具有相关性。

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