在细胞生命活动的精密调控中,存在一种高度有序的、主动的程序性终止过程,即细胞凋亡。这一过程对于维持机体稳态、清除异常细胞至关重要。在凋亡发生的早期,一个关键的、可被检测的分子事件是细胞膜磷脂不对称性的丧失,具体表现为磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内侧翻转到外侧。
PS在正常活细胞中主要分布于细胞膜的内侧小叶。当细胞启动凋亡程序时,一种名为“翻转酶”的活性被抑制,而另一种“爬行酶”的活性被激活,导致PS快速外翻至细胞膜外侧。这一变化是凋亡早期一个非常特异的标志。
基于此原理,Annexin V检测法成为了鉴定早期凋亡细胞的“金标准”。Annexin V是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,对PS具有极高的亲和力。当用荧光染料(如FITC、EGFP、AbFluor™系列染料)标记Annexin V后,它可以特异地结合到凋亡细胞膜外翻的PS上,从而被荧光显微镜或流式细胞仪检测到。
然而,仅凭Annexin V单染无法区分早期凋亡细胞和因其他原因导致细胞膜完整性丧失的细胞(如晚期凋亡或坏死细胞)。因此,通常需要与碘化丙啶(PI) 进行双染。PI是一种膜不通透的核酸染料,无法进入膜结构完整的活细胞和早期凋亡细胞,但可以进入膜受损的细胞并与DNA结合,发出红色荧光。通过Annexin V和PI的双重染色,可以将细胞清晰地分为四个群体:Annexin V-/PI-(活细胞)、Annexin V+/PI-(早期凋亡细胞)、Annexin V+/PI+(晚期凋亡细胞)和Annexin V-/PI+(坏死细胞)。
亚科因生物(Abbkine) 深刻理解研究者对检测灵敏度、稳定性和操作便捷性的需求,开发了全光谱的Annexin V检测试剂盒系列。例如,Annexin V-AbFluor™ 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(货号:KTA0002),采用Abbkine自主优化的AbFluor™荧光标记技术,信号明亮、背景低,分群锐利,确保了流式检测数据的准确性和可重复性。同时,Abbkine还提供从蓝色(AbFluor™ 405)到红色(AbFluor™ 647)等多种荧光标记的Annexin V试剂盒,以及经典的FITC/EGFP标记版本,满足不同实验平台(如流式细胞仪、荧光显微镜)及多重检测的需求。
选择一套可靠的检测工具,是精准捕捉细胞状态转变的第一步。Abbkine致力于为细胞研究提供从基础到前沿的完整解决方案,其产品线覆盖了细胞程序性终止研究的全链条,帮助科研工作者更清晰、更准确地解析生命过程的精细调控。
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