近日，华中农业大学郭文武教授/伍小萌教授团队在JIPB期刊上发表题为“The auxin- CsHAT14 signaling cascade coordinates somatic embryogenesis in citrus”的研究成果。

为构建CsIAA4下游调控体细胞胚发生通路，在‘默科特’橘橙成对的强/弱胚性愈伤组织系RNA-seq数据中筛选到HD-Zip家族基因CsHAT14，其启动子具有ARF蛋白结合基序AuxRE。双荧光素酶、ChIP-qPCR和EMSA实验证实与CsHAT14共表达的CsARF5直接激活其表达。在‘纽荷尔’脐橙胚性愈伤组织中分别干涉CsARF5和CsHAT14表达，均能引起CsHAT14表达水平显著下调，体细胞胚发生能力显著增强；且CsIAA4与CsARF5蛋白水平互作，过表达CsIAA4削弱了CsARF5对CsHAT14的激活作用。

利用ChIP-seq和RNA-seq联合分析，鉴定出300个CsHAT14直接抑制表达的差异表达基因，显著富集到生长素转运、生长素信号和侧根形成等生物学过程。进一步实验证实CsHAT14在柑橘胚性愈伤组织中直接抑制再生相关基因CsDOF3.4、CsWOX13以及生长素转运基因CsPILS5表达。与对照相比，CsDOF3.4在CsHAT14干涉系和CsARF5干涉系中表达水平上调，且在3个候选基因中ChIP-seq信号峰最为显著。添加地塞米松诱导CsDOF3.4过量表达显著提高了CsDOF3.4-GR系体细胞胚发生能力；CsDOF3.4干涉系体细胞胚发生能力显著降低，伴随着18个细胞周期蛋白编码基因表达水平显著下调。

CsARF5通过直接激活CsHAT14表达，并借助CsHAT14对CsDOF3.4的抑制作用，阻碍柑橘愈伤组织体细胞胚发生。而生长素信号抑制子CsIAA4能与CsARF5互作，这种互作减弱CsARF5对CsHAT14的激活效应，最终促进体细胞胚形成。

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