一、Olink技术基本原理
Olink 技术的核心是独有的邻位延伸分析技术（PEA），该技术通过特异性探针设计与核酸扩增检测相结合，实现对目标蛋白质的精准定量分析。其具体反应机制如下：
首先，针对每个目标蛋白质，设计一对带有独特核苷酸序列的特异性抗体探针。当这对抗体探针与样本中的目标蛋白质特异性结合后，若两者处于正确的邻位关系，其末端的 5bp 配对碱基会发生互补结合。随后，在延伸酶的催化作用下，这对探针会形成完整的双链 DNA 模板。最后，利用实时荧光定量 PCR（qPCR）或下一代测序技术（NGS）对该双链 DNA 模板进行扩增和检测，通过特异性核苷酸序列的信号强度来反向推算目标蛋白质的含量。
这种 “抗体结合 - 探针互补 - 核酸扩增” 的技术路线，从根本上保证了检测的特异性和灵敏度，为微量样本中低丰度蛋白质的检测提供了可靠的技术基础。
二、Olink技术核心优势
（一）高特异性与高灵敏度
Olink 技术凭借 PEA 的独特设计，能够有效识别相似度高达 90% 的同源蛋白，大幅降低了交叉反应带来的干扰，展现出卓越的检测特异性。同时，该技术的检测灵敏度可达 fg/ml 级别，能够精准捕捉样本中低丰度蛋白质的表达水平，满足了生物医学研究中对微量生物标志物检测的需求。
（二）高通量与灵活扩展性
Olink 技术具备强大的高通量检测能力，单次检测可产生数百万数据点，能够同时检测 21 种至 384 种蛋白质，通过技术扩展最多可实现 3072 种蛋白质的同步检测。这种高通量特性使得研究人员能够在单次实验中获取大量蛋白质组学数据，显著提高了研究效率，降低了实验成本。
（三）样本适应性强
Olink 技术对样本的需求量极少，仅需 1-8μL 样本即可完成检测，且适用于多种类型的样本，包括细胞裂解液、血清、血浆（EDTA 血浆、柠檬酸血浆、肝素血浆）、间质液体、组织裂解液、脑脊髓液、细胞培养基、微量透析液、穿刺活检样本、干血点、滑膜液、血小板提取物、唾液、尿液等。广泛的样本适应性使得该技术能够应用于不同的研究场景，为多样化的样本检测提供了便利。
（四）宽动态范围与高精准度
该技术具有宽泛的动态检测范围，检测区间覆盖 10 个数量级，能够同时检测样本中高丰度和低丰度的蛋白质。此外，Olink 技术的检测精准度极高，批内变异系数（intra）小于 10%，批间变异系数（inter）小于 20%，确保了检测结果的可靠性和重复性，为数据的科学分析提供了有力保障。
三、Olink技术样本要求
为保证检测结果的准确性和可靠性，Olink 技术对样本提出了明确的要求：
✔️蛋白总浓度需控制在 0.5-1mg/ml；
✔️样本类型需为非 FFPE（福尔马林固定石蜡包埋）样本；
✔️血液类样本（血清或血浆）需提供≥50μL，最多不超过 100μL；
✔️所有样本需冷冻保存，并采用干冰运输；
✔️除上述明确列出的样本类型外，其他特殊样本类型的检测需提前咨询技术支持人员。
严格遵循样本要求是确保 Olink 技术充分发挥其性能优势的前提，能够有效避免因样本质量问题导致的检测误差。
四、Olink技术主要应用领域
（一）精准医学领域
在精准医学研究中，Olink 技术发挥着关键作用。通过对个体蛋白质组学特征的分析，能够实现疾病的早期预测、患者分层以及治疗效果的精准评估。该技术可用于识别与疾病相关的蛋白质标志物（包括 pQTLs 相关标志物），帮助研究人员更好地理解疾病发生、发展的生物学机制，为精准诊断和个性化治疗方案的制定提供依据。此外，在健康管理领域，Olink 技术能够将生活方式与健康状况及疾病风险相关联，为疾病的预防和健康干预提供科学指导。
（二）药物研发全流程
Olink 技术能够为药物研发的各个阶段提供全面的技术支持，赋能药企加速新药研发进程：
✔️药物发现阶段：可用于识别潜在的药物靶点，筛选疾病相关的生物标志物，探索药物作用的分子机制，明确疾病发生的关键途径；
✔️临床前研究阶段：通过体内 / 体外测试，评估药物的安全性和有效性，确定药物的最佳剂量，为后续临床试验提供数据支持；
✔️临床试验阶段（Ⅰ-Ⅲ 期）：在临床 Ⅰ 期，可用于评估药物的安全性和剂量相关性；临床 Ⅱ 期，能够监测药物的功效及不良事件，对患者进行分层；临床 Ⅲ 期，可进一步验证药物的疗效，监控长期安全性和副作用，发现预测性或预后性生物标志物；
✔️FDA 审批阶段：凭借符合监管要求的数据，为药物审批提供有力支撑；
✔️上市后监测阶段：用于探索药物的长期活性，评估疗效稳定性，监控潜在的长期副作用，为药物的临床应用和优化提供持续的数据支持。此外，该技术还可用于执行分析验证，启动伴随诊断（CDx）的开发，进一步推动精准医疗与药物研发的深度融合。
五、结论
Olink 技术作为高通量蛋白组学领域的先进技术，凭借其高特异性、高灵敏度、高通量、样本适应性强等核心优势，以及完善的质量控制体系和广泛的学术与监管认可度，在精准医学、药物研发等多个领域展现出巨大的应用价值。该技术不仅为研究人员提供了强大的蛋白质组学研究工具，助力新的生物标志物发现和疾病机制解析，还为药物研发全流程提供了合规、可靠的数据支持，加速了新药研发进程和精准医疗的落地实施。随着技术的不断发展和优化，Olink 技术有望在更多生命科学研究领域发挥重要作用，为人类健康事业的发展做出更大贡献。
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