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产品名称:氨基-荧光素,6-异构体,2183440-42-6,FAM amine,6-isomer的稳定性因素
一、稳定性影响因素
光稳定性:
长时间光照(尤其是蓝光/紫外光)易导致荧光淬灭,需全程避光操作(如铝箔包裹容器)。连续激发1小时荧光保留率约60-70%,需优化实验条件以减少光损伤。
pH敏感性:
酸性条件(pH<5):荧光强度显著降低,可能因氨基质子化或荧光素母核结构变化。
中性至弱碱性(pH 6.0-7.5):荧光稳定性最佳,适合生物标记反应(如与羧基在EDC/NHS活化下偶联)。
强碱性(pH>9):可能引发水解或结构降解,需避免。
热稳定性:
储存条件:-20℃避光、干燥保存可稳定24个月;反复冻融需避免,建议分装小体积母液(如5-10 μL/管)。
操作温度:室温至37℃下可稳定数小时,高温(>40℃)加速降解,需精确控温(如细胞孵育、标记反应)。
化学稳定性:
氧化敏感性:氨基易被强氧化剂(如H₂O₂)氧化,导致荧光淬灭或结构破坏,需避免与氧化剂接触。
金属离子效应:高浓度金属离子(如Cu²⁺、Fe³⁺)可能引发非特异性结合或荧光淬灭,需使用无金属离子缓冲液(如PBS)。
溶剂效应:在甲醇、DMSO、DMF中溶解度良好,水相中需助溶剂(如乙醇);高浓度(>10 μmol/L)易聚集导致荧光淬灭,需控制使用浓度(通常1-10 μmol/L)。
二、储存与操作规范
储存条件:-20℃避光、干燥保存,分装小体积避免反复冻融;配液后4℃稳定1-2周,工作液现配现用。运输时室温可保存3周,需避免光照和潮湿。
操作要求:
反应体系:pH控制在6.0-7.5,EDC/NHS用量为羧基的1.5-2倍以提高转化率;标记后需通过HPLC或透析纯化,去除游离FAM amine以减少背景荧光。
缓冲液选择:使用无胺/巯基缓冲液(如PBS),避免Tris、甘氨酸或含胺物质以防副反应。
安全注意:潜在致敏性,操作时戴手套、护目镜,废弃物按生物危害处理;避免吸入或皮肤接触。

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