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产品名称:5-羧基荧光素-甲基四嗪,1619222-85-3,5-FAM Me-tetrazine的性能优势与验证数据
1. 性能优势
荧光特性优势:
高灵敏度与低背景:绿色荧光与生物自体荧光分离清晰,信噪比>10:1,适用于低丰度靶标检测。
光稳定性:抗光漂白能力强,支持长时间动态追踪(如活细胞线粒体成像)。
生物正交反应能力:
快速特异性标记:与TCO反应无需金属催化剂,室温下数秒至数分钟完成,适用于活细胞表面蛋白、核酸等生物分子标记。
多场景兼容性:适配流式细胞术、共聚焦显微镜、超分辨率成像(如STED)及体内活体成像。
化学稳定性与生物相容性:
pH耐受性:在中性至弱碱性缓冲液(pH 7.0-8.5)中稳定,避免强酸/碱导致的荧光淬灭。
低毒性:细胞毒性低(IC₅₀>100μM),适合活细胞实验及体内研究。
2. 验证数据
荧光性能验证:
量子产率:荧光素部分量子产率约0.92,发射光谱与常见检测设备(如488nm激光器)高度匹配。
光稳定性测试:在连续光照下,荧光强度衰减率低(<10%/小时),优于传统荧光素衍生物。
反应效率验证:
反应动力学:与TCO的反应速率常数达10⁶ M⁻¹s⁻¹,偶联效率>90%,产物纯度通过HPLC-MS验证>95%。
特异性验证:仅与TCO/降冰片烯等特定环烯烃反应,不与氨基、羧基等常见生物基团交叉反应。
应用案例验证:
蛋白质标记:标记抗体用于免疫荧光(如肿瘤细胞表面受体定位),共定位皮尔逊系数>0.9。
核酸探针:标记DNA/RNA用于荧光原位杂交(FISH),信号强度与靶标浓度呈线性相关。
活细胞成像:标记线粒体探针实现动态追踪,STED模式下分辨率达50nm。
药物递送:标记纳米载体(如脂质体)实现肿瘤靶向成像,肿瘤/背景比>8:1。
体内安全性:小鼠急性毒性实验显示LD₅₀>500mg/kg,无显著器官毒性。
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