微生物实验看似简单，实则对细节要求极高。一个微小疏忽，就可能导致整批实验作废、数据无效，甚至得出完全错误的结论。以下这10个常见错误，很多实验室“老手”都曾踩过坑——尤其是第7个，据不完全统计，超过90%的实验人员都曾中招！
1. 无菌操作流于形式
在超净台外开盖操作；
酒精灯未点燃或火焰太小；
手套反复使用却不更换。
后果：空气或手部微生物污染样本，实验“白做”。
2. 用过期或受潮的培养基/试剂
以为“看起来没坏就能用”？错！
吸潮后的抗生素失效、pH偏移的培养基会抑制目标菌生长。
别让一瓶过期LB毁了你三天的实验！
3. 器皿灭菌不彻底
玻璃瓶洗完还有水珠？移液管没烘干？
这些残留水分可能携带耐热芽孢，高压后依然存活。
灭菌≠消毒，细节决定成败。
4. 移液枪“任性”使用
超量程调节；
枪头松动还硬吸；
长期不校准，误差高达±10%。
你以为加的是100 μL，实际可能是85或115 μL！
5. 培养基配制“凭感觉”
不记录pH、不标日期、不分装一致……
下次重复实验时，连自己都搞不清哪瓶是哪天配的。
实验可重复的前提是：每一步都可追溯！
6. 不做对照，只信“一次成功”
没有阴性对照？没有平行重复？
一旦污染，你根本不知道结果是真是假。
科学不是碰运气，对照组是你的“安全网”。
7. 样品处理不当
这是最隐蔽、也最容易被忽视的致命错误：
采样时没戴无菌手套；
样品在室温下放了几个小时才处理；
稀释时没混匀，上层清液当均匀悬液用；
稀释倍数拍脑袋决定，导致平板菌落“长成一片”或“一个没有”。
据多所高校和检测机构反馈，超九成初学者甚至部分资深人员，在样品前处理环节都存在严重疏漏。而一旦样品出问题，后续所有操作再规范也无济于事！
8. 灭菌参数“差不多就行”
高压锅121℃只压10分钟（标准应为15–20分钟）；
干热灭菌160℃却只烘1小时（需2小时以上）。
“差不多”在微生物实验里，往往等于“完全失败”。
9. 洗耳球、移液管成“污染源”
洗耳球内部发霉却还在用？
移液管上端没塞棉花，吹气时把口腔细菌吹进样品？
这些“隐形污染源”会让你百思不得其解：“明明很小心，怎么又污染了？”
10. 结果判读“想当然”
菌落计数不在30–300 CFU有效范围；
把霉菌当成细菌；
不做镜检或生化验证就下结论。
数据好看≠结果正确，严谨才是科研的生命线。
温馨提醒：
避免这些错误，关键在于建立标准流程 + 养成良好习惯 + 保持怀疑精神。
尤其要重视样品采集与前处理——因为实验的成败，早在你打开培养皿之前就已经决定了！
下次做实验前，不妨对照这份清单检查一遍，别让第7个错误再“偷走”你的数据！
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