某些微生物必须使用血琼脂或巧克力平板，是因为它们属于营养要求苛刻的“苛养菌”（fastidious organisms），在普通基础培养基（如营养琼脂、肉汤等）上无法生长或生长极差。这类细菌对培养基中的特定生长因子有严格依赖，而这些因子通常只存在于哺乳动物血液中。
下面从营养需求角度详细解析：
一、血琼脂（Blood Agar Plate, BAP）的营养特点
血琼脂 = 基础培养基（如哥伦比亚琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂） + 5%~10% 脱纤维羊血/马血
提供的关键成分：
碳源、氮源、氨基酸、维生素、无机盐（来自基础培养基）
额外生长因子（来自血液）：
血红素（X因子）
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD，即V因子）
其他尚未完全明确的促生长物质
主要用途：
支持链球菌属（如肺炎链球菌、化脓性链球菌）、葡萄球菌等中度苛养菌生长
观察溶血现象（α、β、γ溶血），用于细菌初步鉴定
⚠️ 注意：普通血琼脂不能支持嗜血杆菌（Haemophilus）生长，因为其中的X和V因子被红细胞包裹，未释放。
二、巧克力平板（Chocolate Agar）的特殊处理
巧克力平板 = 血琼脂 经80–90℃加热处理
加热的作用：
裂解红细胞，释放出：
X因子（血红素，hemin）
V因子（NAD 或 NADP）
这两种因子是嗜血杆菌（如流感嗜血杆菌 Haemophilus influenzae）绝对必需的生长因子。
为什么叫“巧克力”？
因加热后血液呈深棕色，类似巧克力颜色，并非添加了巧克力。
主要用途：
培养高度苛养菌，包括：
流感嗜血杆菌（需X+V因子）
奈瑟菌属（如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌）
某些放线菌和弯曲菌
✅ 巧克力平板也常置于5% CO₂环境中培养，进一步促进苛养菌生长。
三、典型苛养菌及其营养需求对比
四、总结：为什么必须用血琼脂或巧克力平板？
附：实用提示
血琼脂 ≠ 巧克力平板：前者用于中度苛养菌+溶血观察，后者用于高度苛养菌。
若怀疑流感嗜血杆菌感染（如儿童脑膜炎、会厌炎），必须接种巧克力平板，仅用血平板会漏检。
实验室常将血平板 + 巧克力平板 + 麦康凯平板组合使用，覆盖革兰阳性、革兰阴性及苛养菌。
因此，血琼脂和巧克力平板不仅是“营养更丰富”的培养基，更是满足特定病原微生物不可替代生理需求的关键工具，在临床微生物诊断中具有不可替代的地位。
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