microRNA（miRNA）是一类长度约19-25个碱基的内源性单链非编码RNA，通过转录后基因调控参与细胞增殖、分化、凋亡等关键生理过程，是生命科学领域的研究热点。血清作为miRNA研究的重要样本类型，因易获取、易保存的特点被广泛应用，但血清中 miRNA的提取却因样本自身特性存在诸多难点，成为实验开展的关键瓶颈。做好血清miRNA的高效提取，是实现其精准检测与定量分析的前提，本文将针对血清样本的特点，解析miRNA提取的难点及针对性解决方法。

血清miRNA提取的难点远高于细胞、组织等样本，核心源于血清的无细胞特性与miRNA自身的分子特征，具体集中在两大方面：

一、血清样本中miRNA的自身特性难点

含量极微，远低于其他样本：miRNA本身在生物样本中占比就极低，而血清中无细胞结构，不存在细胞内的RNA储备，相较于有细胞的样本，其miRNA含量大幅降低；常规哺乳动物单细胞中miRNA占总RNA的0.003%-0.02%，血清中该比例更低，直接提升了提取的富集难度。

分子片段过小，易在操作中丢失：miRNA仅有 19-25个核苷酸，属于小分子核酸，在提取的沉淀、吸附等环节中，远不如大分子RNA易被捕捉，血清中低含量的特点进一步放大了这一问题，极易出现提取过程中miRNA大量流失的情况。

二、传统提取方法对血清miRNA的适配性差

常规的Trizol法及通用型RNA提取试剂盒，均以提取rRNA、mRNA等大分子RNA为设计初衷，针对血清miRNA这类低含量小分子核酸的提取效果较差。究其原因，小分子的miRNA难以通过传统醇类沉淀方式实现有效回收，同时也无法被核酸纯化膜、磁珠有效吸附捕捉，用于血清样本时，往往会出现提取得率极低、甚至无法检测到miRNA的情况，完全无法满足后续实验需求。

针对血清miRNA提取的上述核心难点，常规提取思路已不再适用，需采用针对性的富集提取策略，miRNA 富集法是目前经实验验证的血清miRNA高效提取优选方法，也是适配血清无细胞、低含量特点的核心技术。

该方法的核心原理为：利用专用的miRNA富集试剂，对血清中微量、小分子的miRNA进行定向聚集，大幅提升miRNA的局部浓度，解决血清中miRNA含量低、难捕捉的问题；待miRNA充分富集后，再通过核酸纯化柱进行后续的纯化提取操作。经富集后的 miRNA，与纯化柱的吸附和捕捉效率会显著提升，从根本上解决血清miRNA提取过程中易丢失、得率低的问题，实现高效提取。

目前市面上针对血清miRNA的富集提取试剂品类较少，其中 Starvio（星启百代）、Qiagen品牌的miRNA富集提取试剂，针对血清低含量miRNA的富集效果稳定，提取回收率高，能有效满足血清miRNA 提取的实验需求，是血清miRNA提取的优选产品。

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