Y迷宫由三个完全相同的长臂组成，臂间夹角120°，交汇于中央区。常见尺寸如下：
小鼠规格：臂长28-35 cm，宽5-8 cm，高10-15 cm
大鼠规格：臂长42-50 cm，宽10-12 cm，高20-25 cm
迷宫材质采用非反光深色PVC或亚克力板，各臂内壁可粘贴不同几何图形作为视觉标记。迷宫上方1.5 m处安装摄像机，连接行为轨迹分析系统（如EthoVision、VisuTrack等）。
2. 环境控制
实验在隔音、避光、温湿度恒定（22±1℃，湿度50-60%）的专用行为学实验室进行。照明均匀（20-30 lux），背景噪声<50 dB。每次实验前后需用75%酒精彻底擦拭迷宫，混匀或更换垫料，消除动物残留气味对后续实验的干扰。
二、标准化实验流程
Y迷宫实验包含两大核心范式：自发性交替实验（评估工作记忆）和新异臂探索实验（评估参考记忆）。
大小鼠Y迷宫实验箱，XR-XY1032，上海欣软
1. 自发性交替实验
该范式利用动物倾向于依次探索不同臂的自然行为，反映海马-前额叶环路对短期空间信息的实时更新能力。
操作步骤：
适应：实验前24小时将动物移至行为实验室适应环境。实验前可让动物自由探索迷宫5-10分钟以降低新奇感诱发的焦虑。
测试：将动物从任一臂末端面向中央区放入，允许自由探索8分钟，全程录像。
记录：记录动物进入各臂的次序和总进臂次数（以四肢全部进入臂内为准）。
指标计算：
最大交替次数 = 总进臂次数 - 2
实际交替次数：连续进入三个不同臂的次数（如A→B→C、B→C→A等）
自发交替率（%）=（实际交替次数 / 最大交替次数）×100%
正常小鼠自发交替率通常≥65%，若低于50%提示工作记忆严重受损。
2. 新异臂探索实验
该范式通过双阶段设计评估动物的长期空间识别记忆。
操作步骤：
采样阶段（训练期）：随机封闭一个臂（新异臂），动物从起始臂放入，自由探索开放的两个臂10-15分钟，形成空间认知地图。
间隔期：采样结束后间隔设定时间（通常为1-24小时）进行测试。间隔时间决定记忆类型：≤4小时测短期参考记忆，24小时测长期参考记忆。
测试阶段：开放所有臂，动物从起始臂放入，自由探索5分钟，记录进入各臂的次数和停留时间。
核心指标：
新异臂首次进入潜伏期：反映空间好奇心
新异臂探索时间百分比：正常动物>45%，若<40%提示参考记忆缺陷
各臂访问次数分布
三、注意事项
动物处理：提前3-5天每日抚摸动物，减少实验者应激
排除标准：总进臂次数过低（如<10次）或运动功能异常的动物应剔除分析
平衡设计：起始臂选择、新异臂位置在不同动物间平衡，排除位置偏好
交叉污染预防：每只动物测试后彻底清洁迷宫，待酒精挥发干后再进行下一只测试
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